[发明专利]一种基于甜菜碱超分子溶剂制备乳糖酸发酵组合物的方法及其护肤应用

权利要求书

1.一种基于扁桃酸甜菜碱超分子溶剂制备乳糖酸发酵组合物的方法，其特征在于，包括以下制备步骤：

a）扁桃酸、甜菜碱、水以摩尔比（1～2）：（1～2）：10投入反应器，50℃加热4小时，然后以60℃烘干72小时，得到淡黄色扁桃酸甜菜碱超分子NaDES溶剂；

b）将猴头菇菌种接种至种子培养基中，摇床转速为200rpm，25℃培养3天，得到猴头菇菌丝种子液；所述的种子培养基中含有质量分数为5%的葡萄糖、质量分数为2%的蛋白胨和质量分数为0.01%的磷酸二氢钠和硫酸钠，其余为超纯水；

c）取质量分数为5～60%的扁桃酸甜菜碱超分子NaDES溶剂加入质量分数为5%的蔗糖、质量分数为2%的玉米粉、质量分数为0.01%的磷酸二氢钠和硫酸钠,其余为超纯水，得到扁桃酸甜菜碱超分子NaDES溶剂发酵培养液；

d）将步骤b）得到的产物和步骤c）得到的产物以体积比为1：1000进行混合，摇床转速为200rpm，28℃发酵9天，得到发酵液；

e）将得到的发酵液调节PH至4.5，放置4℃环境中沉淀24小时后，以10000rpm离心10分钟，取出上清液，加入木瓜蛋白酶，在28℃条件下，调节PH到6～7之间，酶解4小时，以10000rpm离心10分钟去除蛋白酶；

f）将步骤e）得到的产物加入脱色树脂，脱色树脂添加量为50g～150g/1L步骤e）得到的产物，吸附时间为10分钟～60分钟，然后过滤，得到含麦角硫因与β-葡聚糖的超分子发酵液；

g）把乳糖、步骤f）得到的含麦角硫因与β-葡聚糖的超分子发酵液、糖类氧化酶、过氧化氢酶放入反应器中，用弱碱溶液调节pH值4.5～6.9之间，以0.5L/min流速向发酵体系中通入压缩空气，在28℃发酵8小时，发酵结束后，以80000rpm速率离心处理20分钟，获得上清液，进一步蒸发浓缩，获得扁桃酸甜菜碱超分子NaDES溶剂体系包裹乳糖酸、β-葡聚糖及麦角硫因的最终发酵组合物；

其中步骤g）乳糖用量为35mg～350mg/1L步骤f）得到的超分子发酵液,所述的糖类氧化酶来自Microdochium 真菌属的真菌,糖类氧化酶的添加量是1～3000U/L含乳糖底物的发酵溶剂体系,所述的过氧化氢酶来自真菌Microdochium nivale CBS 100236，过氧化氢酶的添加量是1～2000U/mg乳糖底物，所述的单位U为用于描述酶活力大小的单位，1分钟内能转化1μmol底物的酶量即为1酶单位。

2.根据权利要求1所述的一种基于扁桃酸甜菜碱超分子溶剂制备乳糖酸发酵组合物的方法，其特征在于，步骤a）所述的扁桃酸、甜菜碱、水的摩尔比为1:1:10。

3.根据权利要求1所述的一种基于扁桃酸甜菜碱超分子溶剂制备乳糖酸发酵组合物的方法，其特征在于，步骤c）的扁桃酸甜菜碱超分子NaDES溶剂的添加量为45%。

4.根据权利要求1所述的一种基于扁桃酸甜菜碱超分子溶剂制备乳糖酸发酵组合物的方法，其特征在于，步骤g）所述的乳糖用量为200mg/L，所述的糖类氧化酶的添加量为1000U/L含乳糖底物的发酵溶剂体系,过氧化氢酶的添加量为800U/mg乳糖底物。

5.权利要求1-4任一项所述的乳糖酸发酵组合物在制备促进角质更新、抗氧化、保湿、补水的外用护肤剂中的用途。