[发明专利]一种载阿霉素纳米粒复合温敏凝胶的制备方法

说明书

本发明公开了一种载阿霉素纳米粒复合温敏凝胶的制备方法，步骤如下：S1、DOX‑NPs的制备：称取PLGA、卵磷脂溶解于二氯甲烷作为油相，在油相中加入内水相，冰水浴条件下探头超声，即得初乳；将初乳转移至吐温‑80溶液中，超声即得复乳，减压蒸馏除去二氯甲烷即得DOX‑NPs混悬液；将DOX‑NPs混悬液离心后收集底部沉淀，再加入冻干保护剂蔗糖，冷冻干燥后得到DOX‑NPs冻干粉。本发明采用上述的一种载阿霉素纳米粒复合温敏凝胶的制备方法，方法简便，制备的温敏凝胶实现生物可降解性、良好的缓释性能和较高的生物利用度，有望成为TACE的载药栓塞材料。

技术领域

本发明涉及温敏水凝胶技术领域，尤其是涉及一种载阿霉素纳米粒复合温敏凝胶的制备方法。

背景技术

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是全世界最常见的恶性肿瘤之一。由于其发病隐匿且发展迅速，很多患者发现时已进展至中晚期，从而失去了根治性治疗的机会。经肝动脉化疗栓塞术(transarterial chemoembolization,TACE)是治疗中晚期HCC的首选方法。通过栓塞实现局部缺血坏死，同时化疗药物杀伤肿瘤细胞。传统TACE是以碘油和化疗药物的乳剂为栓塞材料，在临床上最为常用，但存在稳定性较差、释药快和末梢栓塞不完全的问题，一定程度上影响了治疗效果。为解决传统TACE的这些问题，现已开发和应用载药微球。载药微球一般是由聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol,PVA)等有机材料构成，稳定性较好、能够栓塞末梢小动脉且可以实现化疗药物的局部缓释，但载药微球材料不可降解，这往往会导致严重的炎症反应并阻碍后续治疗。HCC易复发，意味着患者可能需要多次TACE治疗，因此栓塞材料的生物可降解性就显得尤为重要。

温敏水凝胶是一类可响应外界环境温度的变化，由液态转变为固态的水凝胶，具有可注射、栓塞血管和长滞留特性，非常适用于TACE给药。其中以天然多糖聚合物，特别是以壳聚糖(Chitosan,CS)为基质的温敏水凝胶，因具有制备工艺简单、成本较低、生物相容性好、生物可降解及抗菌等诸多优点而受到广泛关注。

纳米粒通常是指直径在10～1000nm的粒子，其可通过增加药物半衰期、提高药物稳定性和延长药物释放时间来提高药物的生物利用度。乳酸-羟基乙酸共聚物(Poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA)是一种已通过FDA认证并广泛应用于制药领域的高分子材料，具有可降解性、良好的生物相容性和低毒性的特点。近年来，研究发现通过将纳米粒和温敏凝胶相结合的方式，可实现药物局部的缓慢释放。

发明内容

本发明的目的是提供一种载阿霉素纳米粒复合温敏凝胶的制备方法，方法简便，制备的温敏凝胶实现生物可降解性、良好的缓释性能和较高的生物利用度，有望成为TACE的载药栓塞材料。

为实现上述目的，本发明提供了一种载阿霉素纳米粒复合温敏凝胶的制备方法，步骤如下：

S1、DOX-NPs的制备

称取PLGA、卵磷脂溶解于二氯甲烷作为油相，在油相中加入内水相，冰水浴条件下探头超声，即得初乳；

将初乳转移至吐温-80溶液中，超声即得复乳，减压蒸馏除去二氯甲烷即得DOX-NPs混悬液；

将DOX-NPs混悬液离心后收集底部沉淀，再加入冻干保护剂蔗糖，冷冻干燥后得到DOX-NPs冻干粉；

S2、温敏凝胶负载DOX-NPs

精密称取适量DOX-NPs冻干粉于EP管中，并加入CS溶液，搅拌使其完全溶解，制得混合液a；称取β-GP溶于NaOH溶液中，混合均匀得澄清的β-GP溶液；

于玻璃小瓶中加入混合液a，随后置于冰浴中，继续搅拌，用注射器极缓慢的注入β-GP溶液，继续在冰浴条件下搅拌，即得。