[发明专利]一种培养肿瘤干细胞的试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种试剂盒，包含：明胶、透明质酸和交联剂；所述交联剂为谷氨酰胺转氨酶、戊二醛、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺、京尼平中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包含肿瘤干细胞培养基；

优选地，所述明胶和透明质酸的混合质量比为1：(0.25～2)。

3.一种水凝胶，所述水凝胶的制备方法为：将权利要求1或2所述的试剂盒中的明胶、透明质酸和交联剂混合，孵育，得到；

优选地，所述水凝胶的弹性模量为9～2722Pa。

4.权利要求1～2中任一项所述的试剂盒和/或权利要求3所述的水凝胶在培养肿瘤干细胞中的应用。

5.一种培养肿瘤干细胞的方法，包含采用权利要求1～2中任一项所述的试剂盒或权利要求3所述的水凝胶的步骤。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：

所述方法为(1)或(2)：

(1)将肿瘤干细胞与权利要求1～2中任一项所述的试剂盒中的明胶、透明质酸、交联剂混合，孵育，得到水凝胶；将得到的水凝胶与肿瘤干细胞培养基混合，培养；

(2)将肿瘤干细胞种于权利要求3所述的水凝胶上，加入肿瘤干细胞培养基，培养。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：

(1)中所述肿瘤干细胞在肿瘤干细胞与所述试剂盒中的明胶、透明质酸、交联剂的混合体系中的浓度为2～20万个/mL。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：

(1)和(2)中所述培养的条件为35～39℃，4～6％CO₂；

优选地，(1)中所述孵育的条件为35～39℃下孵育15～60min。

9.根据权利要求6～8中任一项所述的方法，其特征在于：

所述肿瘤干细胞培养基为含以下组分中至少一种的基础培养基：B27、表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素-转铁蛋白-硒-乙醇胺、烟酰胺；

优选地，所述基础培养基为DMEM/F12、DMEM basic中的至少一种；

优选地，所述肿瘤干细胞培养基中还包含抗生素；

优选地，所述肿瘤干细胞为肝癌干细胞、胆管癌干细胞、肺癌干细胞、肠癌干细胞中的至少一种。

10.权利要求5～9中任一项所述的方法在开发抗肿瘤药物中的应用。