[发明专利]一种辣椒受外源糖添加诱导型启动子的克隆及应用

说明书

本发明公开了一种辣椒受外源糖添加诱导型启动子，所述启动子的核苷酸序列如SEQIDN0.1所示，所述启动子来源于辣椒CaRH57基因的上游启动子区。本发明同时公开了上述诱导型启动子的表达载体和转基因植物的构建方法。本发明克隆到了辣椒中与拟南芥AtRH57同源的基因CaRH57的启动子，该启动子为诱导型启动子，不仅能够启动外源基因(GUS基因)在转基因植物(拟南芥)中表达，并且经过外源糖培养处理，该启动子能够增强外源基因GUS的表达，可应用于开展辣椒抗糖胁迫育种。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种辣椒受外源糖添加诱导型启动子的克隆及应用。

背景技术

启动子是基因的一个组成部分，控制基因表达的起始时间和表达的程度。根据其作用方式可分为三类：组成型启动子、诱导型启动子和组织特异型启动子。诱导型启动子是指在某些特定的物理或化学信号的刺激下，该种类型的启动子可以大幅度地提高基因的转录水平。

植物为了生存，在遭遇非生物胁迫时，必须通过形态及生理生化代谢等方面的调整，以适应或抵抗环境胁迫。近年来的研究表明，许多植物基因的表达都受逆境胁迫的诱导，抗逆基因的表达又是依靠其上游启动子的调控来实现的。诱导性启动子通常包含比较保守的顺式作用元件，利用这些保守元件可以推测新基因的可能功能，也可用这些环境应答基因的启动子与抗逆基因融合，从而使转基因植物更好地适应逆境。

糖既是能量和碳骨架的来源，同时也是调控植物生长和发育的重要信号分子。糖响应基因对于植物逆境适应具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术中存在的受外源糖诱导的启动子在异源植物中对下游目的基因表达水平较低的问题，提供一种辣椒受外源糖添加诱导型启动子的克隆及应用。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：一种辣椒受外源糖添加诱导型启动子，所述启动子的核苷酸序列如SEQ ID N0.1所示，所述启动子来源于辣椒CaRH57基因的上游启动子区。

优选地，扩增所述启动子的引物序列如SEQ ID N0.2和SEQ ID N0.3所示。

本发明同时提供了上述诱导型启动子在植物抗糖胁迫育种中的应用。

本发明还提供含有上述诱导型启动子的表达载体。

优选地，上述表达载体还含有GUS基因，所述表达载体的核苷酸序列如SEQ IDN0.4所示。

本发明还提供了一种转基因植物的构建方法，包括以下步骤：将上述表达载体导入目的植物，构建GUS基因表达受到外源糖添加诱导的转基因植物，所述目的植物为拟南芥。

优选地，所述外源糖添加的条件为在1/2MS培养基中添加4.5％的Glc。

本发明所具有的有益效果：本发明克隆到了辣椒中与拟南芥AtRH57同源的基因CaRH57的启动子，该启动子为诱导型启动子，不仅能够启动外源基因(GUS基因)在转基因植物(拟南芥)中表达，并且经过外源糖(4.5％的Glc)培养处理，该启动子能够显著增强外源基因(GUS基因)的表达，对有效开展辣椒抗糖胁迫育种具有重要意义。

附图说明

图1为实施例1中CaRH57启动子片段电泳图；

图2为实施例1中CaRH57启动子的序列分析；

图3为实施例4中CaRH57-GUS转基因拟南芥植株；野生型(Col-0)与CaRH57-GUS转基因植株的表型；

图4为实施例3和实施例4中CaRH57-GUS转基因拟南芥植株的GUS染色分析图。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步的说明。