[发明专利]抗PIVKA-II单克隆抗体及其应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，具体涉及抗PIVKA‑II单克隆抗体及其应用。公开了一组可以配合使用的PIVKA‑II单克隆抗体，本发明PIVKA‑II单克隆抗体与PIVKA‑II结合具有高特异性和稳定性，应用到试剂盒中可以实现实现对PIVKA‑II的高灵敏度、高精密度、宽线性范围的检测。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及抗PIVKA-II单克隆抗体及其应用。

相关申请

本申请要求2021年5月26日提交的申请号CN202110581767.8的优先权，均通过全文提述并入本文。

背景技术

异常凝血酶原(PIVKA-II)，是一种维生素K缺乏诱导蛋白。正常情况下维生素K充足，凝血酶原Gla结构域的10个谷氨酸残基(Glu)能被γ-谷氨酰羧化酶氧化成γ-羧基谷氨酸(Gla)，使之成为有活性的凝血酶原。当肝脏发生异常时，上述位点的一个或多个Glu残基羧化不全，从而形成PIVKA II，丧失凝血活性。因此，PIVKA-II的检测对于肝脏病变至关重要。

目前已知的蛋白检测方法较多，例如：放射免疫分析法(RIA)、酶免疫分析法(EIA)、化学发光免疫法(CLEIA)等。但RIA容易受到放射性同位素的辐射影响，EIA灵敏度低、准确性不高,已逐渐被市场淘汰，相对而言，CLEIA因为其简单的操作和较高的灵敏度逐渐受到关注，成为医疗诊断行业中更佳的选择。

早期的化学发光检测PIVKA II，多采用特异性识别PIVKA II的抗体与识别凝血酶原的抗体搭配使用，但存在检测灵敏度较低的问题，为了改善灵敏度，目前多采用多克隆抗体与单克隆抗体混合使用，但多克隆抗体本身特异性不如单克隆抗体，且因为制备批次不同，容易出现批间差，导致检测精密度降低。所以，高特异性且能配对使用的单克隆抗体，会是化学发光检测PIVKA II，甚至其他采用双抗夹心检测PIVKA II方法学的更好选择，但目前市面上使用的单克隆抗体可选择性较少，且特异性不够，亟待开发更多可供选择的高特异性单克隆抗体。

发明内容

为了解决目前利用双抗夹心检测PIVKA II中存在的灵敏度和精密度不高的问题，本发明公布了高特异性的单克隆抗体，具体如下：

1.抗PIVKA II单克隆抗体，其特征在于，所述抗PIVKA II单克隆抗体选自抗体A、抗体B、抗体C或抗体D；

所述抗体D包括：

如SEQ ID NO:1所列的重链可变区CDR1；

如SEQ ID NO:2所列的重链可变区CDR2；

如SEQ ID NO:3所列的重链可变区CDR3；

如SEQ ID NO:4所列的轻链可变区CDR1；

如SEQ ID NO:5所列的轻链可变区CDR2和

如SEQ ID NO:6所列的轻链可变区CDR3；

所述抗体A包括：

如SEQ ID NO:7所列的重链可变区CDR1；

如SEQ ID NO:8所列的重链可变区CDR2；

如SEQ ID NO:9所列的重链可变区CDR3；

如SEQ ID NO:10所列的轻链可变区CDR1；

如SEQ ID NO:11所列的轻链可变区CDR2和

如SEQ ID NO:12所列的轻链可变区CDR3；

所述抗体B包括：

如SEQ ID NO:13所列的重链可变区CDR1；