[发明专利]一种抗CLDN18.2重组兔单克隆抗体及其应用

说明书

本发明涉及一种抗CLDN18.2重组兔单克隆抗体，包括重链可变区和轻链可变区，重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.6所示；轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.7所示。相比市售的抗CLDN 18.2单克隆抗体，本发明的抗CLDN 18.2单克隆抗体具有更高的亲和力，能够高特异性和高灵敏度地识别CLDN 18.2抗原蛋白和肿瘤细胞和免疫细胞上的CLDN 18.2分子。该抗体可应用于免疫组织化学、间接ELISA、免疫印记、抗体芯片制备、流式细胞术等检测与筛查领域，有利于获得更准确的评估和检测结果，且在产品设计中可以使用更低的抗体浓度，以降低成本。

技术领域

本发明属于免疫化学技术领域，尤其涉及一种抗 CLDN 18.2抗体及其应用，特别是在免疫组织化学检测方面的应用。

背景技术

Claudins（CLDNS）家族蛋白在人体上皮组织中广泛分部，其在上皮细胞维持渗透压、屏障功能、细胞极性以及细胞紧密连接等方面发挥着重要作用。此外，研究表明，在多种肿瘤形成过程中，CLDNS表达模式会发生不同程度的改变。因此，其可作为靶向治疗标志蛋白用于肿瘤治疗研究。CLDN 18蛋白作为CLDNs家族一员，其由人CLDN18基因编码，拥有CLDN18.1和CLDN 18.2两种剪切突变体。其中，CLDN 18.2是一种具有高度选择性的标志蛋白，仅有限度地表达于分化的胃黏膜上皮细胞，而在其余正常组织中表达高度受限。然而，在多种原发性和转移癌种，如胃癌，胰腺癌，食管癌和肺癌中，CLDN 18.2蛋白表达被异常激活。Claudin18.2的异常表达改变细胞原有的极性，并提供肿瘤细胞转移与生长的有利条件。同时，Claudin18.2蛋白表达于细胞膜表面。因此，Claudin18.2作为抗肿瘤潜在靶点具有极大的应用前景。

目前，数款以Claudin18 .2为靶点的抗肿瘤药物进入临床研究阶段，但如何评估恶性肿瘤中Claudin18 .2的表达水平仍无有效的检测手段。免疫组织化学检测是通过酶标抗体的显色反应来确定靶标蛋白位置和表达强度，是检测肿瘤中CLDN 18.2表达水平的有效手段，而CLDN 18.2抗体的质量直接影响最终的显色结果。因此，获得一株高灵敏度、强特异性的抗 CLDN 18.2抗体对CLDN 18.2表达水平的检测具有非常重要的意义。

发明内容

（一）要解决的技术问题

鉴于现有技术的上述缺点、不足，本发明提供一种抗CLDN18.2重组兔单克隆抗体，其与Claudin18.2蛋白的结合具有高特异性和灵敏度，可用于免疫组织化学检测，从而准确评估恶性肿瘤中Claudin18 .2的表达水平。本发明还涉及编码该抗CLDN18.2重组兔单克隆抗体的核苷酸序列、重组质粒、制备方法及抗CLDN18.2重组兔单克隆抗体在Claudin18.2蛋白的检测方法或装置中的应用等。

（二）技术方案

为了达到上述目的，本发明采用的主要技术方案包括：

第一方面，本发明提供一种抗CLDN18.2重组兔单克隆抗体，其包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.6所示；所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.7所示。

第二方面，本发明提供编码基因，用于编码上述抗CLDN18.2重组兔单克隆抗体。

优选地，所述编码基因包括如SEQ ID No.4所示的用于编码所述抗CLDN18.2重组兔单克隆抗体的重链可变区的DNA序列，以及如SEQ ID No.5所示的用于编码所述抗CLDN18.2重组兔单克隆抗体的轻链可变区的DNA序列。

第三方面，本发明涉及一种核酸分子，其包括用于编码所述抗CLDN18.2重组兔单克隆抗体的编码基因。

第四方面，本发明保护一种表达载体，其包括上述的核酸分子。