[发明专利]一种棘托竹荪液体菌种繁育方法

权利要求书

1.一种棘托竹荪液体菌种繁育方法，其特征在于：通过两个阶段的液体摇瓶培养，快速地繁育棘托竹荪的液体菌丝球，具体包含以下步骤：

1）一级液体培养基的配制：按葡萄糖10~20g/L、酵母粉1~2g/L、玉米淀粉6~12g/L、磷酸二氢钾3~5g/L、硫酸镁0.5g/L的配制比例准确称取上述物质溶于自来水中，定容后按50~80ml的装液量分装于体积为250ml的三角瓶中，用透气硅胶塞封口并用报纸包头后进行高压灭菌；

2）棘托竹荪一级液体菌种的制备：在无菌条件下，用接种针挑取长满且吃透料的、蚕豆大小的母种5粒转接于冷却好的一级液体培养基中，完成接种后置于摇床，在25°C、150r/min条件下暗培养5d，完成一级液体菌种的摇瓶培养；

3）二级液体培养基的配制：按照葡萄糖10~20g/L、酵母粉2~5g/L、玉米淀粉8~15g/L、磷酸二氢钾3~5g/L、硫酸镁0.5g/L、羧甲基纤维素钠5~15g/L的配制比例准确称取上述物质溶于自来水中，各成分充分溶解后，按300~400ml的量定容分装于体积为1000ml的三角瓶中，用透气硅胶塞封口并用报纸包头后进行高压灭菌；

4）棘托竹荪二级液体菌种的制备：在无菌条件下，用无菌的5ml枪头吸取一级液体菌种转入二级液体培养基中培养，完成接种后置于摇床，在25°C、150r/min条件下暗培养7d，即完成二级液体菌种的制备。

2.根据权利要求1所述的一种棘托竹荪液体菌种繁育方法，其特征在于：步骤1）中高压灭菌的温度为121°C、时间为20min。

3.根据权利要求1所述的一种棘托竹荪液体菌种繁育方法，其特征在于：步骤3）中高压灭菌的温度为121°C、时间为20min。

4.根据权利要求1所述的一种棘托竹荪液体菌种繁育方法，其特征在于：步骤4）中一级液体菌种转入二级液体培养基中的接种量体积比为1:25~35。