[发明专利]一种丝素蛋白肽自组装载药纳米粒的制备及其肾保护作用

说明书

本发明公开了一种丝素蛋白自组装载药纳米粒的肾保护作用。所述方法在丝素蛋白通过三元溶液加热溶解为丝素蛋白肽。通过自组装包载疏水性药物，得自组装纳米粒子，该纳米粒使用自主装方法将黄芩素粉末与制备的丝素蛋白肽充分混合，制备后经过两天透析除去其中乙醇和氯化钙。本发明以具有良好生物相容性的丝素蛋白肽为运输载体，得到了丝素蛋白肽黄芩素自组装纳米粒。本方法制得的纳米粒子通过实验发现具有肾保护作用，可以明显减弱顺铂诱导的肾损伤作用，并且可以提高药物稳定性，减少用药量和毒性。本发明操作简单，设备简单，适合于产业化生产。

技术领域

本发明涉及生物材料与纳米技术领域，具体涉及疏水性药物自组装成纳米药物的制备方法。

背景技术

纳米载体能通过增加难溶性活性成分的分散度和溶出表面积而增加溶解度，通过小粒径效应改善透膜能力，提高生物利用度，并实现在体内的可控释放。可以解决某些疏水性的药物生物利用度低的问题，同时扩大某些疏水性药物的应用范围。

用氯化钙/水/无水乙醇三元溶液对丝素进行溶解，摩尔比为1:8:2时的氯化钙/水/无水乙醇三元溶液对丝素的溶解能力最好，氯化钙溶解丝素的机理可能是因为氯化钙与丝素中的酪氨酸发生作用，削弱了丝素分子间的范德华力和氢键，从而使丝素无限膨润并且溶解

丝素蛋白(Silk Fibroin)作为一种天然的蛋白质纤维，具有优良的机械性能和良好的生物相容性，对机体无毒性、无致敏和刺激作用，在生物体内又可被降解，并且降解产物不会引起炎症反应，使得蚕丝成为一种优良的生物材料或生物医药的原材料，可被广泛应用于生物医药领域。在生物医用方面，蚕丝蛋白，主要以丝素蛋白为主，以在组织修复、人工血管与生物传感器等组织工程与生物材料方面的研究为主，但也涉及了缓释药物、降血糖、癌症药物的修饰以及抗氧化。而且还可以运载疏水性活性物质，是一种良好的载药纳米粒子构建材料。

黄芩素(5，6，7-三羟基黄酮)提取来源于唇形科植物高黄芩(ScutellariaaltissimaL.) 全草，具有广泛的药理作用。包括抗氧化，抗肿瘤，抗炎，抗菌，抗抑郁，抗病毒和镇静等多种生理活性和药理作用。通过与丝素蛋白肽的相互作用，黄芩素-丝素蛋白肽纳米粒的构建，极大的增强了黄芩素在肝肾损伤方面的保护能力。

作为一种天然聚合物，丝素蛋白肽自组装纳米粒的构建不需要其他可能存在安全隐患的辅料，还可以提高药物的吸收，减少给药刺激性，具有很好的经济前景。

发明内容

本发明为一种对人体无毒性，无刺激性，生物相容性好，生物降解性好的载药纳米载体的构建及其对顺铂造成的肾损伤的肾保护作用。

本发明所要解决的技术问题是提供一种丝素蛋白自组装载药纳米粒的制备方法，及其对于顺铂造成的肾损伤的肾保护作用。

本发明中的丝素蛋白肽自组装载药纳米粒由丝素蛋白肽与疏水性药物黄芩素相互作用在水中自发组装形成。

所述纳米粒中丝素蛋白肽与药物黄芩素的最高质量比为10：1

一种丝素蛋白肽自组装载药纳米粒的制备方法，包括下列步骤：

(1)将蚕茧剪成小块，大概1cm*1cm。后进行脱胶，蚕丝由丝胶和丝素蛋白组成，用碳酸氢钠溶液(0.5wt％)在煮沸的条件下把丝胶除掉。具体步骤：称取ag蚕丝，碳酸氢钠溶液 (0.5wt％)100amL(蚕丝：碳酸氢钠溶液＝1：100)，煮沸30min，两次。之后用去离子水洗涤三次，把蚕丝表面的丝胶和碳酸氢钠洗掉。烘干或晾干。

(2)溶解得到丝素蛋白肽，将14.4ml的去离子水，11.5ml无水乙醇，11.1g氯化钙混匀得到三元溶液。后加入0.6g脱胶后的蚕丝，65℃水浴加热并充分搅拌16小时。常温或冰箱4℃保存。

(3)称取10mg黄芩素，加入5ml制备的蚕丝蛋白肽溶液。用0.1mol/L的盐酸调PH值为6.5，摇晃混匀后放入摇床继续振摇1.5小时。