[发明专利]一种白头翁口服液中5种有效成分同时测定方法

说明书

本发明涉及一种白头翁口服液中5种有效成分同时测定方法，本发明通过超高效液相色谱法同时把5种主要成分一次测定出来，该方法能同时测定白头翁口服液中秦皮中的秦皮甲素和秦皮乙素，黄连和黄柏中的盐酸小檗碱、盐酸巴马汀和盐酸药根碱，共5种成分的含量，该方法快速、灵敏、准确、专属性强，通过一次样品处理，即可同时测定5种成分的含量，不仅节省了试剂、时间，还提高了工作效率。

技术领域

本发明涉及一种白头翁口服液中5种有效成分同时测定方法，属于兽药中有效成分检测领域。

背景技术

白头翁口服液为中兽药成方制剂，以白头翁主药，主要成分：白头翁、黄连、秦皮、黄柏。性状：为棕红色的液体；味苦。取其清热燥湿、凉血止痢的功效，治湿热或热毒积于大肠引起的肠黄作泻、幼畜热痢胃肠湿热壅滞所致之肠黄作泻，黄连苦寒清湿热、厚肠胃，黄柏泻下焦湿热，两药共为清热凉血为臣秦皮涩肠止泻、化湿止痢之功，与上药相配，清热解毒、凉血止痢之效具备，以使热清毒解，痢止而后重自除。是家畜治疗湿热泄泻，下痢脓血常用之药。用法与用量：马、牛150-250mL；羊、猪30-45mL；兔、禽2-3mL。规格：每1mL相当于原生药1g。广泛应用于集约化畜禽养殖企业。

原《中华人民共和国兽药典》2020年版(二部)中药卷只对白头翁口服液中盐酸巴马汀和盐酸小檗碱进行了含量测定，采用流动相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(50∶50)(每100mL中加十二烷基硫酸钠0.4g，再以磷酸调节pH为4.0)，检测波长：347nm，流速：1.0mL/min，进样量：10μL。标准中的检测方法中含盐流动相，容易堵塞色谱柱和管路和单向阀等，对仪器损伤较大，并且测定的有效成分比较少。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种白头翁口服液中5种有效成分同时测定方法。

该方法能同时测定白头翁口服液中秦皮中的秦皮甲素和秦皮乙素，黄连和黄柏中的盐酸小檗碱、盐酸巴马汀和盐酸药根碱，共5种成分的含量，该方法快速、灵敏、准确、专属性强，通过一次样品处理，即可同时测定5种成分的含量，不仅节省了试剂、时间，还提高了工作效率。

为实现以上目的，本发明是通过如下技术方案实现的：

一种白头翁口服液中5种有效成分同时测定方法，用于同时测定白头翁口服液中秦皮甲素，秦皮乙素，盐酸小檗碱，盐酸巴马汀，盐酸药根碱5种有效成分的含量，采用UPLC-PDA方法进行测定，以ACE Excel 3C18 AR为色谱柱，乙腈-0.4％磷酸水溶液进行梯度洗脱，同时利用优化检测波长347nm进行检测，具体洗脱程序见表1：

表1

具体测定步骤如下：

a、制备对照储备液和混合对照储备溶液

取秦皮甲素，秦皮乙素，盐酸小檗碱，盐酸巴马汀，盐酸药根碱标准品，用乙醇溶液溶解并定容，分别配制成对照储备液；将各对照储备液混合，得到混合对照储备溶液；

b、制备待测样品溶液：取供试品，置于容量瓶中，用甲醇-盐酸溶液或乙醇溶液溶解，超声提取、离心、过滤，得待测样品溶液；

c、将混合对照储备溶液注入UPLC-PDA色谱仪，在色谱条件下进行梯度洗脱和检测，以保留时间定性，根据进样量所测峰面积的大小与其进样量的对应关系绘制标准曲线；

d、结果分析：取步骤b待测样品溶液注入UPLC-PDA色谱仪中，在步骤c的色谱条件下进行梯度洗脱和检测，测得滤液中各目标物的峰面积，以保留时间定性，根据步骤d中制作的标准曲线定量，计算出供试品中有效成分的含量。