[发明专利]一株分泌抗新型冠状病毒N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用

说明书

本发明属于免疫学和和体外诊断技术领域，涉及一株分泌抗新型冠状病毒N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，杂交瘤细胞株命名为16F3，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C202113。该杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体为抗新冠病毒N蛋白抗体。本发明所提供的杂交瘤细胞株16F3及其传代细胞株，能够稳定分泌抗新型冠状病毒N蛋白的单克隆抗体，分泌的抗体具有高效价、高亲和力、高特异性和高灵敏度；该抗体针对新型冠状病毒N蛋白，亚型为IgG1，亚型单一，抗体效价高；该抗体能够特异性结合新型冠状病毒2019‑nCoV的N蛋白，特异性好。

技术领域

本发明属于免疫学和体外诊断技术领域，涉及一株能分泌抗新型冠状病毒N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其分泌的单克隆抗体和应用。

背景技术

新型冠状病毒会导致发热、咳嗽以及气促和呼吸困难等呼吸道症状，严重的可导致急性呼吸综合征，甚至死亡。目前对该病毒检测的主要方法是PCR技术，PCR检测的是mRNA水平，且检测用时比较长，需要2～3h；PCR检测对设备、环境和操作人员的要求比较高，检测效率比较低；PCR检测对样本的时效性有要求，样本采集后，需要在一定时间内完成检测，否则会影响检测结果；另外核酸检测的成本比较高。

抗体检测方法是从蛋白水平上进行检测，操作简单快捷，检测时间可缩短至10min左右，提高检测效率；但是，抗体检测是采集血清、全血或血浆进行检测，很容易受样本中其他抗体的干扰，产品灵敏度和准确率相对比较低，检测容易出现漏检和假阳；已经痊愈的患者和复阳患者体内均存在抗体，这种情况下，抗体检测方法无法对二者进行区分；一般抗体的产生需要1周左右的时间，抗体筛查虽然快速方便，但不适合做人群筛查和感染初期的发现。

抗原检测方法相比于抗体检测和核酸检测方法，同样可以使用咽拭子样本，可以在病毒感染早期进行筛查，且对场地和设备要求不高，可以随时随地进行检测，提高检测效率，做到尽早发现，尽早隔离。因此，制备高效价、高灵敏度和特异性的抗体并用于检测，具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一株分泌抗新型冠状病毒N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用。

本发明的技术方案是：

本发明提供了分泌抗新型冠状病毒N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株16F3，其保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)，地址为中国武汉，武汉大学；保藏编号为CCTCCNO：C202113。

本发明还提供了该杂交瘤细胞株的制备方法，即用新型冠状病毒N蛋白的基因重组蛋白进行小鼠免疫，取免疫小鼠脾脏、胸腺和四肢的B淋巴细胞，和小鼠骨髓瘤细胞进行细胞融合，经过亚克隆和筛选得到杂交瘤细胞株，命名为16F3，该细胞株能够稳定分泌抗新型冠状病毒N蛋白单克隆抗体。

本发明还提供了杂交瘤细胞株16F3分泌产生的抗新型冠状病毒N蛋白单克隆抗体。将杂交瘤细胞株16F3分泌的单克隆抗体命名为单克隆抗体16F3。

进一步的，所述单克隆抗体为IgG1亚型，对新型冠状病毒N蛋白有特异性。

本发明还保护所述单克隆抗体在检测新型冠状病毒N蛋白中的应用。

进一步的，所述单克隆抗体用于制备检测新型冠状病毒N蛋白的检测试剂。

本发明的有益效果：

本发明提供的杂交瘤细胞株16F3及其传代细胞株，能够稳定分泌抗新型冠状病毒N蛋白的单克隆抗体，分泌的抗体具有高效价、高亲和力、高特异性和高灵敏度；该抗体针对新型冠状病毒N蛋白，亚型为IgG1，亚型单一，抗体效价高；该抗体能够特异性结合新型冠状病毒2019-nCoV的N蛋白，特异性好。

生物材料保藏信息如下：