[发明专利]一株分泌抗TIGIT单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用有效
| 申请号: | 202210387033.0 | 申请日: | 2022-04-14 |
| 公开(公告)号: | CN114480298B | 公开(公告)日: | 2022-06-24 |
| 发明(设计)人: | 姜威;李荣艳;于永娟;张亚飞;徐小云;戴平 | 申请(专利权)人: | 迈杰转化医学研究(苏州)有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/28;C07K14/705;C07K1/22;C12N15/85;C12N15/12;G01N33/68;G01N33/577;G01N33/58;G01N15/14;C12R1/91 |
| 代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 赵颖 |
| 地址: | 215000 江苏省苏州市苏州工*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 分泌 tigit 单克隆抗体 杂交瘤 细胞株 及其 应用 | ||
1.一株分泌抗TIGIT单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其特征在于,所述分泌抗TIGIT单克隆抗体的杂交瘤细胞株命名为鼠抗人TIGIT单克隆抗体杂交瘤细胞系MJ12-30,保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏编号为CGMCC No.45102,保藏日期为2022年02月24日。
2.一种抗TIGIT单克隆抗体,其特征在于,所述抗TIGIT单克隆抗体由权利要求1所述的鼠抗人TIGIT单克隆抗体杂交瘤细胞系MJ12-30分泌。
3.根据权利要求2所述的抗TIGIT单克隆抗体,其特征在于,所述抗TIGIT单克隆抗体的亚型为IgG1型;
所述抗TIGIT单克隆抗体的重链包括:SEQ ID No.3所示的CDR3、SEQ ID No.4所示的CDR1和SEQ ID No.5所示的CDR2;
所述抗TIGIT单克隆抗体的轻链包括:SEQ ID No.6所示的CDR3、SEQ ID No.7所示的CDR1和SEQ ID No.8所示的CDR2;
所述抗TIGIT单克隆抗体的重链可变区包括SEQ ID No.9所示的氨基酸序列,所述抗TIGIT单克隆抗体的轻链可变区包括SEQ ID No.11所示的氨基酸序列;
所述抗TIGIT单克隆抗体的重链全长包括SEQ ID No.10所示的氨基酸序列;所述抗TIGIT单克隆抗体的轻链全长包括SEQ ID No.12所示的氨基酸序列。
4.根据权利要求2所述的抗TIGIT单克隆抗体,其特征在于,所述抗TIGIT单克隆抗体还含有修饰缀合物,所述修饰缀合物包括辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、生物素、异硫氰酸荧光素、Cy3或Cy5中的任意一种或至少两种的组合。
5.一种权利要求2~4中任一项所述的抗TIGIT单克隆抗体的制备方法,其特征在于,所述抗TIGIT单克隆抗体的制备方法包括:
培养权利要求1所述的分泌抗TIGIT单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化,获得所述抗TIGIT单克隆抗体。
6.权利要求1所述的分泌抗TIGIT单克隆抗体的杂交瘤细胞株和/或权利要求2~4中任一项所述的抗TIGIT单克隆抗体在制备TIGIT蛋白表达检测产品中的应用。
7.一种TIGIT免疫组织化学检测试剂盒,其特征在于,所述TIGIT免疫组织化学检测试剂盒包括权利要求2~4中任一项所述的抗TIGIT单克隆抗体;
所述TIGIT免疫组织化学检测试剂盒还包括:免疫组织化学抗原修复缓冲液、封闭液、酶标二抗、显色剂或苏木素复染液中的任意一种或至少两种的组合。
8.一种TIGIT免疫印迹检测试剂盒,其特征在于,所述TIGIT免疫印迹检测试剂盒包括权利要求2~4中任一项所述的抗TIGIT单克隆抗体;
所述TIGIT免疫印迹检测试剂盒还包括:SDS-PAGE凝胶、聚偏二氟乙烯膜、封闭液或酶标二抗中的任意一种或至少两种组合。
9.一种TIGIT酶联免疫吸附检测试剂盒,其特征在于,所述TIGIT酶联免疫吸附检测试剂盒包括权利要求2~4中任一项所述的抗TIGIT单克隆抗体;
所述TIGIT酶联免疫吸附检测试剂盒还包括:封闭液、酶标二抗、显色液或终止液中的任意一种或至少两种组合。
10.一种TIGIT免疫荧光检测试剂盒,其特征在于,所述TIGIT免疫荧光检测试剂盒包括权利要求2~4中任一项所述的抗TIGIT单克隆抗体;
所述抗TIGIT单克隆抗体修饰有荧光基团,所述荧光基团为异硫氰酸荧光素、Cy3或Cy5中的任意一种。
11.一种TIGIT流式细胞术检测试剂盒,其特征在于,所述TIGIT流式细胞术检测试剂盒包括权利要求2~4中任一项所述的抗TIGIT单克隆抗体。
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