[发明专利]一种用于治疗糖尿病骨脆性增加的前体产物研究方法

说明书

本发明公开了一种用于治疗糖尿病骨脆性增加的前体产物研究方法，包括以下步骤：步骤一：选择小鼠为实验对象，对实验小鼠采用病理化处理；本发明采用对小鼠进行病理化处理，并筛选出符合条件类型的2型糖尿病小鼠，通过采用MG直接清除、降低MG合成及诱导MG降解酶合成三种途径抑制2型糖尿病小鼠体内DM系统，一方面通过采用单克隆抗体1H7G5检测骨细胞组织中甲基乙二醛源性咪唑AGEs，另一方面采用高效液相色谱‑串联质谱法分析骨组织甲基乙二醛的含量，并根据色谱柱确定采用MG直接清除、降低MG合成及诱导MG降解酶合成三种途径抑制后小鼠骨组织的甲基乙二醛含量质量，从而能够获得抑制MG系统的最优路径，为临床治疗糖尿病骨脆性增加提供了新思路。

技术领域

本发明属于生物学研究技术领域，具体涉及一种用于治疗糖尿病骨脆性增加的前体产物研究方法。

背景技术

糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损，或两者兼有引起。长期存在的高血糖，导致各种组织，特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍。约有0.1％～ 0.4％的糖尿病患者合并有骨关节病，年龄分布从20岁以前直至79岁，高发的年龄段为50～59岁，该年龄段的患者占全组的1/3。糖尿病患者众多，以2型为主，影响较1型糖尿病更加广泛。骨关节病更容易发生于长期口服降糖药而病情控制不好的患者。糖尿病患者血糖升高、胰岛素抵抗会影响骨量和骨质量，导致骨脆性增加、骨折风险升高。据报道，2 型糖尿病患者的骨折风险明显高于正常群体。

甲基乙二醛(methylglyoxal，MG)是糖尿病患者糖基化终产物AGEs的前体，可以引起成骨细胞凋亡，破骨细胞分化(细胞离体培养已证明)，并可以引起骨胶原非酶交联增多，进而引起矿化晶体异质性增加。但是现有技术中并未有相关糖尿病骨脆性增加的前体产物研究方法以及MG异常积累引起骨微结构及生物力学改变的阈值范围，无法为临床治疗糖尿病骨脆性增加提供新思路。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供一种用于治疗糖尿病骨脆性增加的前体产物研究方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种用于治疗糖尿病骨脆性增加的前体产物研究方法，包括以下步骤：

步骤一：选择小鼠为实验对象，对实验小鼠采用病理化处理；

步骤二：实验对象病理化检测，筛选符合实验要求的病理小鼠；

步骤三：抑制病理小鼠DM系统；

步骤四：骨组织取样；

步骤五：对骨组织采用单克隆抗体检测；

步骤六：分析骨组织甲基乙二醛含量；

步骤七：分析数据结果。

优选的，所述步骤一中，选取一定数量的小鼠，以糖分、脂肪含量高的饲料对小鼠进行饲养，诱发小鼠患取糖尿病。

优选的，所述步骤二中，在小鼠饲养阶段定期对小鼠血液组织血糖检测，初步筛选出血糖高于正常标准的小鼠。

优选的，所述步骤二中，在初步筛选后，采用micro-CT、有限元分析及病理染色方式筛选2型糖尿病小鼠(皮质增厚，小梁减少，小梁间隙增宽)。

优选的，所述步骤三中，通过MG直接清除、降低MG合成及诱导MG降解酶合成三种途径抑制DM系统，研究MG异常积累引起骨微结构及生物力学改变的阈值范围。

优选的，所述步骤三中，分别采用MG直接清除、降低MG合成及诱导MG降解酶合成三种方式对2型糖尿病小鼠进行处理，A组采用MG直接清除处理方式，B 组采用降低MG合成处理方式，C组采用诱导MG降解酶合成处理方式，D组为空白对照组不做任何处理。