[发明专利]一种非衍生化同步检测血清中17种类固醇激素的试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种非衍生化同步检测血清中17种类固醇激素的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括洗脱液、稀释液、萃取剂、质控品和色谱柱，所述萃取剂为乙酸乙酯/正己烷。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述萃取剂中乙酸乙酯与正己烷的体积比为(0.5-2)：1，更优选地，乙酸乙酯与正己烷的体积比为1:1。

3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述洗脱液包括洗脱液A和洗脱液B，其中，所述洗脱液A为氟化铵水溶液，所述洗脱液B为质谱纯甲醇。

4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述稀释液为空白血清基质，所述质控品为以所述稀释液作溶剂的溶液。

5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述质控品有3种，低中高浓度的QC1，QC2，QC3，其中溶质分别是：浓度分别为：0.47、0.94、4.93ng/mL的睾酮；浓度分别为：2.39、15.14、31.79ng/mL的孕酮；浓度分别为：0.49、1.77、5.71ng/mL的17α-羟孕酮；浓度分别为：8.00、95.65、126.57ng/mL的皮质醇；浓度分别为：0.24、0.32、0.49ng/mL的醛固酮；浓度分别为：0.13、0.48、4.51ng/mL的二氢睾酮；浓度分别为：0.49、7.88、79.98ng/mL的孕烯醇酮；浓度分别为：0.47、3.11、6.43ng/mL的皮质酮；浓度分别为：0.17、0.74、6.27ng/mL的11-脱氧皮质酮；浓度分别为：0.52、1.02、4.87ng/mL的11-脱氧皮质醇；浓度分别为：0.54、1.25、5.87ng/mL的雄烯二酮；浓度分别为：0.45、228.93、1237.99ng/mL的脱氢表雄酮；浓度分别为：1.497、20.68、151.94ng/mL的可的松；浓度分别为：2.16、12.84、142.24ng/mL的17α-羟基孕烯醇酮；浓度分别为：0.91、4.84、10.06ng/mL的18-羟基皮质酮；浓度分别为：0.80、4.92、10.16ng/mL的21-脱氧皮质醇；浓度分别为：5.45、44.08、108.5ng/mL的雄烯二醇。

6.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括复溶液、标准品和内标液，所述复溶液为甲醇和水的混合液，甲醇和水的体积比为1:1；

所述标准品为17种类固醇激素与所述复溶液的混合溶液，所述17种类固醇激素睾酮、17α-羟孕酮、醛固酮、二氢睾酮、皮质酮、11-脱氧皮质酮、11-脱氧皮质醇、雄烯二酮、18-羟基皮质酮、21-脱氧皮质醇分别为0.1、0.5、1、2、5、10和20ng/mL，孕酮和孕烯醇酮分别为0.25、1.25、2.5、5、12.5、25和50ng/mL，17α-羟基孕烯醇酮、可的松、皮质醇、雄烯二醇分别为1.5、7.5、15、30、75、150和300ng/mL，脱氢表雄酮为15、75、150、300、750、1500和3000ng/mL；

所述内标液为15种类固醇激素溶液的混合溶液，所述15种类固醇激素溶液为纯甲醇配制的睾酮-d₃、17α-羟孕酮-d₈、醛固酮-d₇、二氢睾酮-d₃、皮质酮-d₄、11-脱氧皮质酮-d₇、11-脱氧皮质醇-d₅、雄烯二酮-¹³C₃、18-羟基皮质酮-d₄、孕酮-d₉、孕烯醇酮-20,21-¹³C₂-16,16-d₂、皮质醇-d₄、17α-羟基孕烯醇酮-d₃、可的松-d₈、脱氢表雄酮-d₅的混合溶液。

7.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述色谱柱为Waters ACQUITYBEHC18，1.7μm，50×2.1mm。