[发明专利]一种对伊马替尼耐药的胃肠道间质瘤PDX模型的构建方法有效

专利信息
申请号: 202210373819.7 申请日: 2022-04-07
公开(公告)号: CN114667970B 公开(公告)日: 2023-08-22
发明(设计)人: 杨建军;王舒;李宏伟;聂勇战;张杰;徐光辉;郑吉阳;罗佳琳 申请(专利权)人: 中国人民解放军空军军医大学
主分类号: C12N5/09 分类号: C12N5/09;A01K67/027
代理公司: 西安尚睿致诚知识产权代理事务所(普通合伙) 61232 代理人: 赵香宇
地址: 710038 陕*** 国省代码: 陕西;61
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摘要:
搜索关键词: 一种 伊马替尼 耐药 胃肠道 间质 pdx 模型 构建 方法
【权利要求书】:

1.一种对伊马替尼耐药的胃肠道间质瘤PDX模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)、筛选患者:将手术后病理确诊为胃肠道间质瘤且能通过手术获取原位或者转移病灶肿瘤组织标本的患者作为筛选患者;

2)、取样:留取筛选患者的原位或转移病灶肿瘤组织作为样本,样本体积>6mm*6mm*6mm,样本采集后需立即放入预冷至4℃的组织保护液中;

3)、制备移植块:将样本切割成直径为3-5 mm的小肿瘤块作为移植块;

4)、构建P0代免疫缺陷小鼠:将所述移植块移植到免疫缺陷小鼠体内,形成P0代免疫缺陷小鼠;

5)、构建P1、P2和P3代免疫缺陷小鼠:将P0代免疫缺陷小鼠体内生长的肿瘤组织切除,切成3mm*3mm的小块移植到另一免疫缺陷小鼠体内,形成P1代免疫缺陷小鼠;将P1代免疫缺陷小鼠体内生长的肿瘤组织切除,切成3mm*3mm的小块移植到再另一免疫缺陷小鼠体内,形成P2代免疫缺陷小鼠;将一部分P2代免疫缺陷小鼠体内生长的肿瘤组织切除,切成3mm*3mm的小块移植到再另一免疫缺陷小鼠体内,形成P3代免疫缺陷小鼠; 待P0代免疫缺陷小鼠体体内的肿瘤组织体积达到800mm3之后再将P0代免疫缺陷小鼠体内生长的肿瘤组织切除;待P1代免疫缺陷小鼠体体内的肿瘤组织体积达到800mm3之后再将P1代免疫缺陷小鼠体内生长的肿瘤组织切除;待P2代免疫缺陷小鼠体体内的肿瘤组织体积达到800mm3之后将P2代免疫缺陷小鼠体内生长的肿瘤组织切除;

6)、对P2和P3代免疫缺陷小鼠进行给药:当P2和P3代免疫缺陷小鼠体内生长的肿瘤组织长至200mm3后,对各P2和P3代免疫缺陷小鼠按照肿瘤组织体积大小随机分组,并对每组分别设置对照组和治疗组,其中,治疗组给予伊马替尼,对照组给予生理盐水;治疗组按照伊马替尼0.1mg/g剂量,腹腔给药,每两天注射一次;对照组按照生理盐水0.1mg/g剂量,腹腔给药,每两天注射一次;

7)、确定对伊马替尼耐药的胃肠道间质瘤PDX模型:每周测量3次给药后的小鼠的体积及其肿瘤组织的体积,当对照组的肿瘤组织的体积长至2000~3000mm3时,比较治疗组的各小鼠的肿瘤组织的体积,体积最大的小鼠即为对伊马替尼耐药的胃肠道间质瘤PDX模型。

2.根据权利要求1所述的对伊马替尼耐药的胃肠道间质瘤PDX模型的构建方法,其特征在于,所述步骤2)中的组织保护液具体为冰冷PBS+1%双抗。

3.根据权利要求1所述的对伊马替尼耐药的胃肠道间质瘤PDX模型的构建方法,其特征在于,取样后的肿瘤组织要在6小时内移植到免疫缺陷小鼠体内。

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