[发明专利]一种贝莱斯芽孢杆菌YH-18高效产孢的工业化发酵方法有效
| 申请号： | 202210371903.5 | 申请日： | 2022-04-08 |
| 公开（公告）号： | CN114854664B | 公开（公告）日： | 2023-09-26 |
| 发明（设计）人： | 石慧敏;叶建仁;王焱;陆蓝翔;耿薏舒 | 申请（专利权）人： | 南京林业大学;上海包晟生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N3/00 | 分类号： | C12N3/00;C12N1/20;C12R1/07 |
| 代理公司： | 南京智转慧移知识产权代理有限公司 32649 | 代理人： | 田沛沛 |
| 地址： | 210037 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 贝莱斯 芽孢 杆菌 yh 18 高效 工业化 发酵 方法 | ||
1.一种贝莱斯芽孢杆菌YH-18高效产孢的工业化发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：1)采用以下重量百分比的原料配制贝莱斯芽孢杆菌YH-18高效产孢的工业化发酵培养基：0.5％葡萄糖、2％玉米淀粉、1％玉米浆干粉、0.5％鱼粉蛋白胨、0.1％硫酸铵、0.1％硫酸镁、0.1％磷酸氢二钾、0.2％碳酸钙和0.02％硫酸锰；2)挑取LB平板上贝莱斯芽孢杆菌YH-18单菌落至含LB培养基摇瓶中，恒温震荡条件下进行活化培养，得到一级种子液；3)将一级种子液以1％接菌量接入LB培养基摇瓶中，恒温震荡条件下进行培养，得到二级种子液；4)将二级种子液接种至发酵罐，分别依照200L、5000L的一级、二级发酵罐规模进行逐级扩大发酵培养，待发酵液中芽孢率达到95％后停罐。
2.根据权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌YH-18高效产孢的工业化发酵方法，其特征在于，步骤1)中，葡萄糖和硫酸锰单独灭菌后在接种贝莱斯芽孢杆菌YH-18时再加入。
3.根据权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌YH-18高效产孢的工业化发酵方法，其特征在于，步骤2)中，恒温震荡条件为28℃，转速200rpm，培养18～24小时；LB培养基摇瓶中的装液量为20/50mL。
4.根据权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌YH-18高效产孢的工业化发酵方法，其特征在于，步骤3)中，恒温震荡条件为28℃，转速200rpm，培养18～24小时；LB培养基摇瓶中的装液量为0.8/2L。
5.根据权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌YH-18高效产孢的工业化发酵方法，其特征在于，步骤4)中，一级发酵罐以60％装液量、1.12％接菌量、0.05％的消泡剂、在初始pH7.3、培养温度33℃、转速200r/min条件下发酵培养6-8h；二级发酵罐以60％装液量、4％接菌量、0.05％的消泡剂、在初始pH7.3、培养温度33℃、转速100r/min条件下发酵培养。
6.根据权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌YH-18高效产孢的工业化发酵方法，其特征在于，步骤4)中，发酵液中芽孢的含量为3.9×109CFU/mL。
7.根据权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌YH-18高效产孢的工业化发酵方法，其特征在于，步骤4)中，发酵培养过程中，通过调整进气量维持发酵液中溶氧情况。
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