[发明专利]一种ARHGAP35蛋白在猪X和Y精子鉴定或分离中的应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种ARHGAP35蛋白在猪X和Y精子鉴定或分离中的应用。本发明利用DIA蛋白组学技术对猪X、Y精子膜蛋白进行蛋白质组学分析，然后鉴定筛选到在X精子膜蛋白中特异性表达的蛋白ARHGAP35，可以作为分离猪X、Y精子的性别特异性标识蛋白。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种ARHGAP35蛋白在猪X和Y精子鉴定或分离中的应用。

背景技术

性别控制技术是通过干预动物正常的生殖过程，有选择性地预先决定动物后代性别的新兴生物技术，它在缓解食物短缺问题的同时，还可以有效解决阉割等动物福利问题。

目前现有的性别控制技术包括在精子发生过程中通过基因编辑技术改变产生X精子和Y精子的比例、根据X精子和Y精子的大小、活力、电荷、表面抗原和DNA含量等方面的差异分离成熟精子、通过改变雌性生殖道环境来筛选最终到达卵母细胞的精子以及通过早期胚胎鉴定来筛选体外胚胎的性别。但是由于成本昂贵、现有技术受限等问题，大部分的技术仍然停留在实验室阶段，无法在畜牧业生产实践中使用(Xie Y,Xu Z,Wu Z,et al.SexManipulation Technologies Progress in Livestock:A Review[J].Front VetSci.2020,7:481.)。流式细胞仪分选精子技术是目前最为成功的精子分选技术，他通过X、Y精子头部DNA含量的差异分选精子(Johnson L A,Flook J P,Look M V,et al.Flowsorting of X and Y chromosome-bearing spermatozoa into two populations[J].Gamete Res.1987,16(1):1-9.Johnson L A,Flook J P,Look M V,et al.Flow sortingof X and Y chromosome-bearing spermatozoa into two populations[J].GameteRes.1987,16(1):1-9.)，已经广泛运用于奶牛的生产实践中。然而在养猪业中，很少使用流式细胞仪分选精子。在流式细胞仪分选的过程中猪精子的细胞膜被破坏，导致其活力、受精能力、体外保存的能力下降(Garcia E M,Vazquez J M,Parrilla I,et al.Improving thefertilizing ability of sex sorted boar spermatozoa[J].Theriogenology.2007,68(5):771-778.Maxwell W M,Johnson L A.Physiology of spermatozoa at highdilution rates:the influence of seminal plasma[J].Theriogenology.1999,52(8):1353-1362.)。此外，母猪单次输精的量通常比牛要高得多(Bathgate R.Functionalintegrity of sex-sorted,frozen-thawed boar sperm and its potential forartificial insemination[J].Theriogenology.2008,70(8):1234-1241.Vazquez J M,Parrilla I,Roca J,et al.Sex-sorting sperm by flow cytometry in pigs:issuesand perspectives[J].Theriogenology.2009,71(1):80-88.)。因此，目前急需一种新的方法来改变仔猪的性别比例。