[发明专利]一种从油橄榄果渣油脱臭馏出物中分离赤桐甾醇的方法

权利要求书

1.一种从油橄榄果渣油脱臭馏出物中分离赤桐甾醇的方法，其特征在于该分离方法的步骤如下：

A、油橄榄植物甾醇制备

以油橄榄果渣油脱臭馏出物为原料，经酯化、酯交换、冷析、过滤与重结晶步骤处理，得到纯度以重量计95％以上油橄榄植物甾醇；

B、β-谷甾醇分离

把步骤A得到的植物甾醇添加到正丁醇-环己酮混合溶剂中，在温度70～80℃下搅拌30～60min，趁热过滤，将收集滤液的温度降至30～35℃，并在这个温度下保持120～150min，过滤，得到含有β-谷甾醇富集物的滤饼，它接着按照同样方式重复处理1～3次，得到β-谷甾醇产品滤饼；这种滤饼减压干燥，β-谷甾醇纯度达到以重量计95％以上；

所得到的滤液合并，减压浓缩至合并滤液体积的1/6～1/5，再将其温度降至10～15℃，并在这个温度下保持120～150min，过滤，滤饼经干燥得到植物甾醇混合物X；

C、赤桐甾醇富集

步骤B得到的植物甾醇混合物X使用固定相I与流动相I按照体积比1:1混合的混合相I溶解，得到一种植物甾醇混合物X溶液，使用高速逆流色谱仪分离纯化，其流出液采用UV检测器在波长210nm处检测，收集同一峰的流出液，脱除溶剂，分别得到植物甾醇混合物X₁、植物甾醇混合物X₂和植物甾醇混合物X₃；

D、赤桐甾醇纯化

步骤C得到的植物甾醇混合物X₂使用固定相II与流动相II按照体积比1:1混合的混合相II溶解，得到植物甾醇混合物X₂溶液，采用同样色谱分离纯化与处理，分别得到δ-5,23-豆甾二烯醇和赤桐甾醇浓缩物，它们分别在浓度为以体积计95％乙醇中重结晶，经过滤与烘干，得到纯度为以重量计90％以上δ-5,23-豆甾二烯醇与赤桐甾醇。

2.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于在步骤A中，所述的油橄榄果渣油脱臭馏出物的甾醇类物质含量是以重量计12～35％，其甾醇类物质的组成如下：以重量计

3.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于在步骤B中，在正丁醇-环己酮混合溶剂中，以毫升计正丁醇与以毫升计环己酮的比是1：0.25～0.5；以克计植物甾醇与以毫升计正丁醇-环己酮混合溶剂的比是1：3～5。

4.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于在步骤B中，所述植物甾醇混合物X的组成如下：以重量计

5.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于在步骤C中，固定相I与流动相I制备方法如下：

将以毫升计正己烷、以毫升计乙酸乙酯、以毫升计甲醇与以毫升计水的比是1：1.5：0.5：1，将它们装到分液漏斗中，充分振荡，静置分层30min，上层溶液是固定相I，而下层溶液是流动相I。

6.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于在步骤C中，高速逆流色谱仪分离纯化条件如下：以流速2.0mL/min将固定相I填充到分离管路中，然后将主机转速调节至800～900rpm，在这个转速下平衡10min，再以流速1.0～1.2mL/min泵入流动相I。

7.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于在步骤C中，植物甾醇混合物X₁是含有以重量计49～55％菜油甾醇与23～26％豆甾醇的富集物；植物甾醇混合物X₂是含有以重量计35～41％δ-5,23-豆甾二烯醇与42～54％赤桐甾醇的富集物；植物甾醇混合物X₃是含有以重量计52～61％β-谷甾醇、7～9％谷甾烷醇、12～14％δ-5-燕麦甾醇与20～23％δ-5,24-豆甾二烯醇的富集物。

8.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于在步骤D中，固定相II与流动相II制备方法如下：将以毫升计正己烷、以毫升计乙腈与以毫升计甲基叔丁基醚的比是1：1.4：0.6，将该混合溶剂装到分液漏斗中，充分振荡，静置分层30min，上层溶液是固定相II，下层溶液是流动相II。