[发明专利]一种以苄基硼酸频哪醇酯类为检测基团的近红外荧光探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种以苄基硼酸频哪醇酯类为检测基团的近红外荧光探针PNQB，其特征在于：

分子式为：C₄₃H₃₈BN₄O₂；

分子结构如下：

2.权利要求1所述以苄基硼酸频哪醇酯类为检测基团的近红外荧光探针PNQB的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将2-(2-甲基-4H-苯并吡喃-4-亚基)丙二腈醛加入2-吡喏甲醛的醇溶液中，在惰性气体保护的加热回流条件下进行反应，反应完成后减压蒸除溶剂，再经二氯甲烷/乙醇为洗脱剂层析分离，得到中间体2-(2-吡喏-4H-苯并吡喃-4-亚基)丙二腈；

2)向步骤1)得到的中间体2-(2-吡喏-4H-苯并吡喃-4-亚基)丙二腈中加入N，N-二甲基甲酰胺和三氯氧磷，在惰性气体保护的加热回流条件下进行反应，反应完成后倒入水，并用二氯甲烷萃取，经无水硫酸钠干燥过滤后，再经二氯甲烷/乙醇为洗脱剂层析分离，得到中间体2-(5-吡喏甲醛-4H-苯并吡喃-4-亚基)丙二腈；

3)取步骤2)得到的中间体2-(5-吡喏甲醛-4H-苯并吡喃-4-亚基)丙二腈加入4-甲基喹啉硼酸频哪醇酯的醇溶液中，在惰性气体保护的加热回流条件下进行反应，反应完成后减压蒸除溶剂，再经二氯甲烷/乙醇为洗脱剂层析分离，得到目标化合物所述近红外荧光探针。

3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于：

步骤1)中，2-(2-甲基-4H-苯并吡喃-4-亚基)丙二腈醛和2-吡喏甲醛的摩尔比为1∶1～1∶1.5；反应时间为4-12小时；反应溶剂为：甲醇、乙醇或异丙醇；二氯甲烷/乙醇作为洗脱剂的体积比10/1～30/1。

4.根据权利要求3所述制备方法，其特征在于：

步骤2)中，中间体2-(2-吡喏-4H-苯并吡喃-4-亚基)丙二腈和N，N-二甲基甲酰胺之间的摩尔比为1∶1～1∶5；中间体2-(2-吡喏-4H-苯并吡喃-4-亚基)丙二腈和三氯氧磷之间的摩尔比为1∶1～1∶5；反应时间为6-24小时；二氯甲烷/乙醇作为洗脱剂的体积比20/1～50/1。

5.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于：

步骤3)中，中间体2-(5-吡喏甲醛-4H-苯并吡喃-4-亚基)丙二腈和4-甲基喹啉苄基硼酸频哪醇酯之间的摩尔比为1∶1～1∶3；反应时间为12-36小时；反应溶剂为：甲醇、乙醇或异丙醇；二氯甲烷/乙醇作为洗脱剂的体积比10/1～50/1。

6.权利要求1所述以苄基硼酸频哪醇酯类为检测基团的近红外荧光探针PNQB作为ONOO^-检测试剂的应用。

7.权利要求1所述以苄基硼酸频哪醇酯类为检测基团的近红外荧光探针PNQB在检测ONOO^-中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，具体应用方式为：在探针PNQB浓度为10μmol/L、二甲亚砜含量为3％-10％、pH值为7.30的Hepes溶液中对ONOO^-实现选择性快速检测。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：探针PNQB在室温条件下与ONOO^-反应，荧光发射变化明显，具体现象为：探针PNQB与1.00当量以上的ONOO^-作用时，在778nm处弱的荧光发射峰增强，无其它发射峰存在。

10.一种ONOO^-的定性定量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.在室温条件下，将权利要求1所述以苄基硼酸频哪醇酯类为检测基团的近红外荧光探针PNQB溶解到二甲亚砜中，然后采用Hepes溶液稀释，配制得到检测溶液；

该检测溶液中所含探针PNQB的浓度为10μmol/L、二甲亚砜含量为3％-10％；

采用的Hepes溶液浓度为10mmol/L，pH值为7.3；

S2.将S1配制的检测溶液加入含有ONOO^-的待测溶液中，进行荧光光谱检测，记录荧光响应。