[发明专利]一种水生蔬菜中抗生素的检测方法

权利要求书

1.一种水生蔬菜中抗生素的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

采用甲酸乙腈溶液对水生蔬菜样品进行提取得到提取液；

对得到的所述提取液采用分散固相萃取法进行净化得到净化液；

对得到的净化液使用三重四级杆复合线性离子阱质谱法进行测试。

2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：

步骤S1：称取粉碎均匀的水生蔬菜样品，置于离心管中；向所述离心管中加入甲酸乙腈溶液和氯化钠，涡旋振荡均匀后离心，取上层乙腈溶液即为所述提取液；

步骤S2：将步骤S1得到的所述上层乙腈溶液置于装有PSA、C18和无水Na₂SO₄的分散固相萃取净化管中，涡旋振荡均匀后离心，取上清液即为所述净化液；

步骤S3：将步骤S2得到的所述上清液经有机滤膜过滤后使用三重四级杆复合线性离子阱质谱法进行测试。

3.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤S1中，所述甲酸乙腈溶液的浓度为0.05％-1.0％。

4.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤S1中，所述样品与所述甲酸乙腈溶液的配料比为：5-20重量份数：10-30体积份数。

5.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤S1中，所述向所述离心管中加入甲酸乙腈溶液和氯化钠，涡旋振荡均匀后离心的具体步骤如下：

先向所述离心管中加入所述甲酸乙腈溶液，涡旋振荡5min-20min，再加入所述氯化钠，涡旋振荡1min-10min，然后在4℃下6000r/min离心1min-10min。

6.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤S2中，所述上层乙腈溶液与所述PSA、所述C18和所述无水Na₂SO₄的配料比为：1-5体积份数：10-80重量份数：10-80重量份数：10-100重量份数。

7.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤S2中，涡旋振荡的时间为1min-10min，离心的速度为6000r/min，离心的时间为1min-10min。

8.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤S3具体为：

步骤S31：选定多种抗生素并确定抗生素的质谱条件，选定最优的样品前处理方法，包括提取溶剂选择和净化方法优化；

步骤S32：配制选定的多种抗生素的混合标准工作溶液；

步骤S33：用三重四级杆复合线性离子阱质谱法分析，然后以每一种抗生素浓度为横坐标，对应的色谱峰面积为纵坐标，绘制每种抗生素的标准工作曲线；

步骤S34：将步骤S2得到的所述上清液注入三重四级杆复合线性离子阱质谱系统中，采用MRM-IDA-EPI扫描模式，根据两对MRM离子对、保留时间和EPI谱库检索确定抗生素种类，并将其峰面积带入对应抗生素的标准工作曲线，从而得到所述上清液中所选定的各抗生素含量。

9.如权利要求8所述的检测方法，其特征在于：所述步骤S32具体为：准确称取每种抗生素标准品各10±0.1mg，分别置于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，配制成浓度为1mg/mL标准储备液，于-18℃冰箱保存；临用时，根据需要逐级稀释成不同浓度的混合标准工作溶液。

10.如权利要求8所述的检测方法，其特征在于：步骤S3中，所述三重四级杆复合线性离子阱质谱法的条件包括：电离源：电喷雾离子源；扫描方式：sMRM-IDA-EPI，正离子扫描；电喷雾电压：5500V；雾化气压力：50psi；辅助气压力：50psi；气帘气压力：35psi；离子源温度：550℃。