[发明专利]一种肠炎沙门氏菌活疫苗

说明书

本发明提供一种禽肠炎沙门氏菌活疫苗，包含有抗原和佐剂，其中抗原是活的肠炎沙门氏菌(Salmonella enterica)R073△aroA株，其保藏编号为CCTCC M 2022376。所述的肠炎沙门氏菌R073ΔaroA株是通过Red/ET同源重组系统把肠炎沙门氏菌R073株的aroA基因缺失制备的。本发明所提供的肠炎沙门氏菌疫苗可以通过传统的方法进行使用，比如通过经济易操作的喷雾和饮用水进行大规模的施用，也可以通过肌肉注射或其他的方式进行施用。

技术领域

本发明属于兽医生物制品技术领域，具体涉及一种肠炎沙门氏菌活疫苗。

背景技术

肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)属于无宿主特异性并且有侵害性的病原菌之一，宿主包括人以及各种动物。肠炎沙门氏菌不仅能引起家禽发病和死亡，造成严重的经济损失，而且被污染的家禽产品如禽蛋和禽肉能作为作为肠炎沙门氏菌的携带着严重危害人类健康。根据国内外报道，美国、欧盟以及日本等发达国家发生的食物中毒事件中50％～80％是由禽沙门氏菌引起的，其中主要病原为肠炎沙门氏菌(S G Mellroy,etal.1989)。由肠炎沙门氏菌引起人的急性胃肠炎(食物中毒)，在世界各国有增加的趋势，已成为国际公共卫生的一个重要课题。

肠炎沙门氏菌病发病时间快、死亡率高，目前养殖业中主要使用抗生素治疗细菌感染性疾病。但是在动物机体中长期使用低于治疗剂量的抗生素能大大加速耐药细菌的出现，如果耐药菌一旦在养殖动物中大范围传播，将使养殖动物成为很大的耐药基因储藏库。因此通过疫苗来预防，利用非抗生素方法防控沙门氏菌病将是未来发展的必然趋势，其中接种疫苗是有效防控沙门氏菌病发生和流行、减少禽产品污染及保证食品安全的重要途径。但是目前沙门氏菌病疫苗多为化学随机突变活或者自然传代弱毒活疫苗，遗传背景不清晰，具有毒力返强的危险。

随着分子生物学及DNA重组技术的快速发展，基因工程疫苗成为近年来的研究热点，基因缺失苗的优点显而易见，既能保障疫苗保护效果，又降低了毒力返强的可能性利。

发明内容

本发明的目的是提供一种禽肠炎沙门氏菌活疫苗，是在筛选获得了一种新型的肠炎沙门氏菌的基础上，通过删除aroA基因制备的弱毒株，使用该弱毒株来制备疫苗；该弱毒株保持了流行毒株肠炎沙门氏菌所具备的天然的免疫原性，同时毒性明显致弱，遗传背景清晰，缺失株不会返强，从而弥补现有技术的不足。

本发明所提供的肠炎沙门氏菌活疫苗，包含有抗原和佐剂，其中抗原是活的肠炎沙门氏菌(Salmonella enterica)R073△aroA株，其保藏编号为CCTCC NO: M 2022376，保藏地址:中国武汉武汉大学，中国典型培养物保藏中心，保藏日期为：2022 年04月02日。

所述的肠炎沙门氏菌R073ΔaroA株是通过Red/ET同源重组系统把肠炎沙门氏菌R073株的aroA基因缺失制备的。

所述的疫苗佐剂为水性疫苗佐剂。

本发明所提供的疫苗还用于制备用于防治家禽的制品；

所述的家禽包括鸡、鸭、火鸡、鹅、矮脚鸡、鹌鹑、野鸡、鸽子等，优选的是商业上重要的家禽例如鸡、鸭、鹅、火鸡，更优选的是鸡和火鸡，特别优选的是鸡。

本发明所提供的肠炎沙门氏菌疫苗可以通过传统的方法进行使用，比如通过经济易操作的喷雾和饮用水进行大规模的施用，也可以通过肌肉注射或其他的方式进行施用。

附图说明

图1：aroA基因在肠炎沙门氏菌R073染色体中的位置图。

图2：肠炎沙门氏菌R073 aroA基因敲除路线图。

图3：PCR鉴定肠炎沙门氏菌R073 aroA基因敲除株图。

图4：肠炎沙门氏菌R073与R073△aroA生长曲线图。