[发明专利]溪荪花部建立病毒诱导基因沉默体系的方法在审
| 申请号： | 202210357682.6 | 申请日： | 2022-04-06 |
| 公开（公告）号： | CN114990155A | 公开（公告）日： | 2022-09-02 |
| 发明（设计）人： | 王玲;刘桂伶;叶王斌;王磊;吕汝彤;闫蕾;史恭发 | 申请（专利权）人： | 东北林业大学 |
| 主分类号： | C12N15/84 | 分类号： | C12N15/84;A01H5/02;A01H6/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 150040 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 溪荪花部 建立 病毒 诱导 基因 沉默 体系 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种鸢尾属植物溪荪植株花部上建立病毒诱导基因沉默体系的方法，侵染部位为溪荪未着色的花苞时期，长度为2.5-3cm，花苞完整且花葶直立。
2.将目的基因连接pTRV2病毒载体，并与pTRV1质粒分别导入农杆菌中，再将两种农杆菌按体积比1∶1混合后用于侵染。
3.如权利要求2所述的方法，侵染液现用现配，以无菌水作为溶剂，其中含有MES 10mM、AS 200μM、MgCl2 10mM，调节农杆菌菌液浓度达OD600到1.8-2.0时，制成农杆菌侵染缓冲液。
4.如权利要求3所述的方法，调节侵染缓冲液OD600为0.8-1.0。
5.用带有针头的无菌注射器自上而下对花苞顶部扎入一个伤口，注射1mL侵染液到溪荪的花苞中，保证花苞直立，菌液不会留出，接种后无需闭光。
6.如权利要求2所述的方法，所用农杆菌为GV3101。
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