[发明专利]一种用于棉花枯萎病防治的贝莱斯芽孢杆菌菌剂的发酵制备及应用

说明书

本发明涉及一种用于棉花枯萎病防治的贝莱斯芽孢杆菌菌株RJW‑5‑5，其属于芽孢杆菌属，其命名为Bacillus velezensis RJW‑5‑5；保藏登记号为CGMCC No.22939；保藏时间为2021年07月22日；保藏机构为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)；保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号；该菌株的菌落形态为椭圆形或圆形，颜色为乳白色，质地粘稠，边缘粗糙。本发明涉及的生防菌株生产工艺简单、培养时间较短，并且该菌株可以通过简单、快捷低成本的制备方法获得防治棉花枯萎病的生防菌剂。通过试验证明，本发明提供的生物菌剂具有很好的防治效果，温室防效可达到82.79％，田间防效可达到80.44％，显著高于对照，进一步提高棉花品质和产量。

技术领域

本发明属于生物防治技术领域，具体涉及一种防治棉花枯萎病的生防菌株，以及生防菌剂和田间应用试验。

背景技术

棉花枯萎病是棉花生产中危害最严重的病害之一，曾被称为棉花的“癌症”之一。棉花枯萎病对棉株生育影响很大，在苗期即可发生，严重时大量死苗，造成田间植株数大量减少。特别是在定苗以后，大量棉株发病，叶片发黄、干枯脱落、直至萎蔫枯死，导致结铃数量较少，铃重减轻，同样造成棉花减产，棉花品质降低。尖孢镰刀菌萎蔫专化型真菌(Fusarium oxysporum f.sp.Vasinfectum)是棉花枯萎病的病原菌，它在自然条件下很容易存活，能够产生分生孢子，主要通过土壤、种子和肥料进行传播。棉花枯萎病是典型的维管束病害，棉花在整个生长发育期均可染病。棉花枯萎病有很多种类型的发病症状，苗期有青枯型、红叶型、黄化型、皱缩型、黄色网纹型等；蕾期有皱缩型、光秆型、枯斑型、半边黄化型、顶枯型等。棉花枯萎病的防治是提高棉花产量的重要途径之一。

棉花枯萎病的初侵染来源主要来自带菌的棉籽、棉籽壳、病残体和病田土壤。该病害是典型积年流行病，受到气候条件、耕作制度、栽培管理及土壤中线虫等因素影响。目前防治棉花枯萎病的农业方法主要有：种植抗病品种、适时播种、轮作换茬、增施有机肥和清除病株。但受到地区环境和种植习惯的影响，轮作种植很难进行大面积的推广，且枯萎病菌生命力较强能在土壤中存活很长时间，短期轮作达不到明显的防治效果，长期轮作又很难开展。深翻土壤和合理密植等田间管理方法均无法彻底杀灭病原菌，对棉花枯萎病的防治达不到理想的效果。

目前防治棉花枯萎病应用较多的方法是化学药剂：①种子处理：25％多菌灵浸泡种子，2％戊唑醇可分散粉剂拌种播种。②土壤处理：可在整地时，每亩撒施50％福美双可湿性粉剂和50％多菌灵可湿性粉剂。③药剂防治：病害发生初期是防治的关键时期，常见的杀菌农药有多菌灵、甲基托布津、56％醚菌酯百菌清、80％恶霜福美双可湿性粉剂、80％乙蒜素三唑酮乳油、棉花三清等。化学药剂用于零星病区的病株和局部土壤处理效果较显著，但是，长期使用单一性作用机制的化学药剂会使作物产生抗药性，防治无效。化学药剂的毒性较强且绝大多数药剂都易挥发，农药会经过人体呼吸道直接进入施药人体内，引起急性中毒。且绝大多数化学药剂残留严重，留在作物上，进入食物链后，会在各级消费者体内积累，严重危害人和动物的健康。

因此寻找一种经济、有效的防治棉花枯萎病的生物菌剂成为保障棉花安全绿色生产的迫切任务。生物防治因其对环境友好和生防菌具有很好的抗性，而越来越受到重视。植物根际促生菌(PGPR)的概念提出以来，更多的研究表明PGPR除了具有固氮、溶磷、解钾和产生植物生长调节剂等直接促生作用外，还具有拮抗病原菌和诱导系统抗性等间接促生作用。近几年来随着生物技术的不断发展，针对性的筛选高效拮抗微生物，提高抑菌的效果，成为研究的热点。

CN112175888A公开了一种贝莱斯芽孢杆菌Hsg1949，并公开了其在防治花生果腐病、花生白绢病菌、棉花黄萎病菌、棉花立枯病菌或棉花枯萎病菌中的应用。CN112458012A公开了一种贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)TK2019微生物菌剂，并公开了其在在制备防治棉花黄萎病、棉花黄萎病、棉花枯萎病、红枣黑斑病药物中的应用。但是仍然存在筛选更多能够高效防治棉花枯萎病等作物病害的需求。

发明内容