[发明专利]一种复合固定化菌剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种复合固定化菌剂，包括复合微生物菌剂和复合固定化载体，其特征在于，所述复合微生物菌剂包括毛霉菌Mucor sp.FMM菌剂、黑曲霉菌Aspergillus niger SF05菌剂和分枝杆菌Mycobacterium sp.BFZG菌剂；所述复合固定化载体包括生物炭和硼泥。

2.根据权利要求1所述的固定化菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂中，毛霉菌Mucor sp.FMM悬浮液、黑曲霉菌Aspergillus niger SF05悬浮液和分枝杆菌Mycobacterium sp.BFZG悬浮液以体积比1-2:1-2:1-2混合；

且其中，所述毛霉菌Mucor sp.FMM悬浮液浓度为1.0-1.2g/L，所述黑曲霉菌Aspergillus niger SF05悬浮液浓度为0.2-0.3g/L，所述分枝杆菌Mycobacteriumsp.BFZG悬浮液OD600值为0.8-1.2。

3.根据权利要求2所述的固定化菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂中，毛霉菌Mucor sp.FMM悬浮液、黑曲霉菌Aspergillus niger SF05悬浮液和分枝杆菌Mycobacterium sp.BFZG悬浮液以体积比1:2:1混合。

4.根据权利要求1所述的固定化菌剂，其特征在于，所述生物炭和所述硼泥的质量比为1:1。

5.一种权利要求1至4中任一项所述复合固定化菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、制备复合微生物菌液：制备含有毛霉菌Mucor sp.FMM、黑曲霉菌Aspergillusniger SF05和分枝杆菌Mycobacterium sp.BFZG的悬浮液的复合微生物菌液；

S2、制备复合固定化载体：将生物炭和硼泥均匀混合，得到复合材料，将所述复合材料在在无氧条件下焙烧，冷却，得到所述复合固定化载体；

S3、制备复合固定化菌剂：将步骤S2得到的所述复合固定化载体加入混合培养基中，经高温灭菌，冷却后，加入步骤S1得到的所述复合微生物菌液，震荡培养40小时以上，于无菌条件下，过筛冲洗后得到所述复合固定化菌剂。

6.根据权利要求5所述的复合固定化菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，所述复合微生物菌液由毛霉菌Mucor sp.FMM悬浮液、黑曲霉菌Aspergillus niger SF05悬浮液和分枝杆菌Mycobacterium sp.BFZG悬浮液以体积比1-2:1-2:1-2混合得到；

其中，毛霉菌Mucor sp.FMM悬浮液浓度为1.0-1.2g/L，黑曲霉菌Aspergillus nigerSF05悬浮液浓度为0.2-0.3g/L，分枝杆菌Mycobacterium sp.BFZG悬浮液OD600值为0.8-1.2。

7.根据权利要求5所述的复合固定化菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，所述生物炭和硼泥以质量比1:1混合。

8.根据权利要求5所述的复合固定化菌剂的制备方法，所述步骤S3中，所述混合培养基为LB培养基和PDA培养基，体积比为1:2；所述高温灭菌温度为121℃，灭菌时间为30分钟；所述培养温度为30℃，培养时间48小时，转速为80r/min。