[发明专利]一种基于深紫外发射碳点检测牛奶中四环素类抗生素的方法

说明书

本发明公开了一种基于深紫外发射碳点检测牛奶中四环素类抗生素的方法，属于分析检测领域。本发明基于深紫外发射碳点检测牛奶中四环素类抗生素的方法包括如下步骤：(1)将富含羟基、氨基和羧基的物质制备为碳点溶液；(2)牛奶与四环素混合后进行简单的预处理，再与(1)中碳点混合，荧光光谱检测得到混合溶液荧光淬灭程度，最后构建四环素浓度和混合溶液荧光强度淬灭程度标准曲线；(3)根据步骤(2)的标准曲线，达到检测牛奶样品中四环素类抗生素的目的。本发明首次以深紫外发射碳点为荧光探针实现对牛奶中的四环素类抗生素的定量检测，且有灵敏度高、操作简单、安全、能量利用率高和成本低廉的优点，适合常规分析。

技术领域

本发明涉及一种基于深紫外发射碳点检测牛奶中四环素类抗生素的方法，属于分析检测领域。

背景技术

抗生素在细菌感染的治疗和预防中起着重要作用，其中四环素类抗生素(TCs)是最常用的抗生素之一，四环素类抗生素中常见的为四环素(TC)、土霉素(OTC)、金霉素(CTC)和强力霉素(DOX)等，这类抗生素因其广谱抑菌效果好被广泛使用。但是四环素的滥用会导致四环素残留于乳制品中，并最终富集于人体中，这会对人体健康造成一定的影响。

目前，检测牛奶中四环素的方法有很多，例如，高效液相色谱(HPLC)、免疫分析法(immunoassays)、毛细管电泳法(capillary electrophoresis，CE)、比色法(colorimetry)和化学发光法(chemiluminescence method)等。然而，这些方法大多需要昂贵的仪器，复杂的操作和长的时间消耗。

荧光法具有灵敏度高、操作简单、成本低和省时等优点。利用荧光纳米材料作为荧光探针进行检测，极大地提高了检测的灵敏度，且检测具有操作简单、检测时间短和灵敏度高的优点，目前荧光光谱技术已广泛地应用于环境、化学、医药食品等领域，也有一些学者提出使用荧光光谱技术对牛奶中四环素类抗生素进行检测，据我们调查，将深紫外发射碳点应用于食品检测还没有被报道过。

发明内容

[技术问题]

目前检测牛奶中四环素类抗生素的主要方法有：高效液相色谱、免疫分析法、毛细管电泳法、比色法和化学发光法等。其检测大多耗时且涉及复杂的样品处理过程，或是需要专业技术人员和昂贵的成本。而利用深紫外发射碳点应用于食品检测还没有被报道过。

[技术方案]

针对上述问题，本发明提供了一种基于深紫外发射碳点检测牛奶中四环素类抗生素的方法，本发明基于内滤效应和氢键作用这两个机理的共同作用下，提出了基于深紫外发射碳点用于牛奶中四环素类抗生素的检测方法，可以实现便捷、安全和灵敏地定量检测牛奶中的四环素类抗生素。

本发明提供了一种基于深紫外发射碳点作为新型荧光探针检测牛奶中的四环素类抗生素的方法，包括以下步骤：

(1)制备深紫外发射碳点：将2，4-二羟基苯甲酸和赖氨酸加入到水中，混匀进行水热反应，结束后，固液分离、收集滤液，得到深紫外发射碳点溶液(DUV-CDs)；

(2)将一系列已知浓度的四环素牛奶溶液与乙腈混合、膜过滤，获得相应四环素测试样品；

(3)稀释步骤(1)所得深紫外发射碳点溶液，然后与步骤(2)的四环素测试样品混合，采集相应的荧光光谱信息，分别获得四环素浓度为0时样品的荧光强度峰值F₀、以及其他浓度时样品的荧光强度峰值F；通过(F₀-F)/F₀计算得到淬灭程度C，以淬灭程度C与相应样品的四环素浓度进行线性关联，获得定量检测模型。

在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中，2，4-二羟基苯甲酸和赖氨酸质量比为(0.8-1.2)：1。具体可选1：1。

在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中，赖氨酸相对水的浓度为6-8mg/mL。