[发明专利]一种同期放化疗后人结直肠癌细胞及其构建方法及应用

说明书

本发明提供了一种同期放化疗后人结直肠癌细胞HCT116CRR及其构建方法和应用，制备得到了能够体外培养生长稳定、能稳定传代，能在裸鼠体内成瘤且保持其生物学特性的同期放化疗后人结直肠癌细胞株，可以方便的建立体外的同期放化疗抵抗人结直肠癌动物模型，可应用于制备、筛选、评价抗人结直肠癌药物。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种同期放化疗后人结直肠癌细胞HCT116CRR及其构建方法及应用。

背景技术

结肠直肠癌（carcinoma of colon and rectum）胃肠道中常见的恶性肿瘤，早期症状不明显，随着癌肿的增大而表现排便习惯改变、便血、腹泻、腹泻与便秘交替、局部腹痛等症状，晚期则表现贫血、体重减轻等全身症状。其发病率和病死率在消化系统恶性肿瘤中仅次于胃癌、食管癌和原发性肝癌。

放、化疗是大肠癌特别是直肠癌综合治疗的重要手段，在同期放化疗应用日趋广泛的同时，放化疗抵抗的问题也日趋凸显，现有研究多从放疗抵抗或化疗耐药单方面探讨肿瘤细胞对治疗产生耐受的机制，而肿瘤细胞对同期放化疗产生耐受有不同于对单独放疗或化疗产生抵抗的特殊原因。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种同期放化疗后人结直肠癌细胞HCT116CRR及其构建方法及应用。

本发明的具体技术方案为：

一种同期放化疗后人结直肠癌细胞，命名为人结直肠癌细胞HCT116CRR，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO：C2021299。

该人结直肠癌细胞HCT116CRR的保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏单位的地址位于中国 武汉 武汉大学，保藏日期为2021年10月27日，该人肝结直肠癌细胞HCT116CRR被命名为人结直肠癌细胞HCT116CRR。

本发明所述的人结直肠癌细胞HCT116CRR的构建方法，包括如下步骤：

1）选取人结直肠癌细胞HCT-116体外培养；

2）待细胞生长至约80% 融合时将其暴露于10μmol/L的5-Fu中，同时在室温下给予4Gy的6Mv X-ray照射；

3）暴露于5-Fu中培养24小时，更换新鲜培养液，待残余细胞恢复生长；

4）重复步骤2）和步骤3）的操作9次，得到人结直肠癌细胞HTC116CRR。

本发明所述的人结直肠癌细胞HCT116CRR在mRNA研究方面的应用。

本发明所述的人结直肠癌细胞HCT116CRR在制备体外同期放化疗抵抗结直肠癌细胞模型方面的应用。

本发明所述的人结直肠癌细胞HCT116CRR在建立体外的同期放化疗抵抗人结直肠癌动物模型中的应用。

本发明所述的人结直肠癌细胞HCT116CRR在制备、筛选、评价抗人结直肠癌药物的应用。

本发明的有益效果为：

本发明提供了一种同期放化疗后人结直肠癌细胞HCT116CRR及其构建方法和应用，制备得到了能够体外培养生长稳定、能稳定传代，能在裸鼠体内成瘤且保持其生物学特性的同期放化疗后人结直肠癌细胞株，可以方便的建立体外的同期放化疗抵抗人结直肠癌动物模型，可应用于制备、筛选、评价抗人结直肠癌药物。

附图说明

图1经10次同期放化疗诱导后，HCT116CRR细胞株形态学变化；

图2 Colongenic survival assay结果；

图3多靶单击模型拟合细胞存活曲线；

图4细胞悬液接种法建立一代移植瘤；

图5瘤组织接种法建立二代移植瘤；

图6 HCT116CRR细胞皮下移植瘤生长的情况；