[发明专利]一种新冠抗体或其抗原结合片段及其应用

说明书

本发明涉及一种新冠抗体或其抗原结合片段及其应用。本发明提供的抗体灵敏度高、特异性好，无交叉反应，对新型冠状病毒的诊断具有重要作用。

本案是为分案申请，原申请的申请日为2021年9月10日，申请号为202111063235.1，发明名称为“一种新冠抗体或其抗原结合片段及其应用”。

技术领域

本发明属于蛋白检测领域。更具体地，涉及一种新冠抗体或其抗原结合片段 及其应用。

背景技术

冠状病毒是一种有囊膜的单股正链RNA病毒。根据冠状病毒的遗传学进化、 血清学和宿主特异性差异，冠状病毒分为四个属：α-冠状病毒属、β-冠状病毒 属、γ冠状病毒属和δ冠状病毒属。β冠状病毒属的病毒又可以分为A、B、C、 D四个组群。α和β冠状病毒主要感染包括人类、家畜、宠物在内的哺乳动物， γ和δ冠状病毒主要感染鸟类及哺乳动物。新型冠状病毒属于β-冠状病毒属， 从进化树位置上看，2019-nCoV与SARS和类SARS病毒的类群相邻，它们在进 化上共同的外类群是一个寄生于果蝠的HKU9-1冠状病毒。2019-nCoV有包膜， 颗粒呈圆形或椭圆形，常为多形性，直径50-200nm。

SARS-CoV-2属于冠状病毒科，为不分节段的单股正链RNA病毒。它编码 两个大的重叠开放阅读框(ORF1a和ORF1b)，4种结构蛋白(S、E、M和N 蛋白)，以及9种辅助蛋白。其中，N蛋白是病毒粒子的核心成分，它与病毒基 因组RNA结合，将RNA包装成核糖核蛋白(RNP)复合体。除了组装外，N 蛋白还在病毒mRNA转录和复制中发挥重要作用，并参与免疫调节。有研究报 道N蛋白可以与双链RNA结合而具有RNAi抑制活性，可以对抗宿主RNAi介 导的抗病毒反应，同时，N蛋白还可诱导感染后的体液和细胞免疫应答，使其成 为早期快速诊断和疫苗研发的关键靶标。

SARS-CoV-2N蛋白全长419个氨基酸，大小为43-50kDa。N蛋白有三个 相对保守的结构域，其中一域可与病毒基因组RNA相互缠绕形成病毒核衣壳， 在病毒RNA的合成过程中发挥着重要的作用，与病毒基因组复制和调节细胞信 号通路有关。N蛋白是一个磷酸化蛋白，磷酸化能够调节N蛋白的构象，增强 与病毒蛋白的构象，增强与病毒RNA的亲和力。在核衣壳包装过程中，N蛋 白可与M蛋白相互作用，促进核衣壳包装成病毒粒子。感染早期机体就能产生 抗N蛋白的高水平抗体，可以利用N蛋白建立快速检测2019-nCoV血清抗体方 法。因此N蛋白常作为冠状病毒诊断检测工具，是免疫学快速诊断试剂的核心 原料。

综上所述，2019-nCoV N蛋白检测对新型冠状病毒的诊断具有重要作用，开 发用于2019-nCoV N蛋白检测的单克隆抗体具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种新冠抗体或其抗原结合片段及其应用。

在一些实施方案中，本发明可以包括下述一项或多项：

一种抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段结合 SARS-CoV-2核衣壳蛋白第44-180位氨基酸片段。

以及在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段进一步地不结合 SARS-CoV-2核衣壳蛋白第44-84位氨基酸片段、第65-103位氨基酸片段、第 96-136位氨基酸片段、及第130-180位氨基酸片段。

本发明的另一目的是提供了一种抗体对，包含如上所述的抗体或其抗原结合 片段。

本发明还提供了包含所述氨基酸片段的融合蛋白、核酸分子、表达载体构建 物及宿主细胞。

本发明还提供了一种试剂盒，包含上述所述的抗体、所述抗体对、所述融合 蛋白、所述核酸分子、所述表达载体构建物或所述宿主细胞。

本发明还提供了上述所述的抗体或其抗原结合片段，或者所述抗体对在制备 试剂盒中的应用。

本发明还提供了一种制备所述抗体的方法。