[发明专利]一种甲状腺球蛋白IgM抗体的检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种甲状腺球蛋白IgM抗体的检测试剂盒，属于生物医药技术领域。该检测试剂盒，包括：¹²⁵I标记的人甲状腺球蛋白，2‑巯基吡啶琼脂糖，TBST缓冲液和牛血清白蛋白。本发明首次将含2‑巯基吡啶琼脂糖引入RBA检测平台，直接结合IgM，读取抗原抗体复合物的放射性强度，计算出样品中抗体的含量指数，建立了TG IgM的直接法检测方案，减少了间接法可能导致的检测中信号的丢失。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种甲状腺球蛋白IgM抗体的检测试剂盒。

背景技术

桥本甲状腺炎(HT)是一种十分常见的自身免疫性疾病，起病隐匿，进展快慢不一，临床表现复杂多样，初诊时约20％表现为甲状腺功能减低，5％为轻度甲状腺功能亢进，大多数为甲状腺功能正常，但由于腺体萎缩、破坏，最终也将发展为甲状腺功能减退。HT发生甲状腺功能减退的概率随病程延长而逐渐增加，甲状腺功能减退发生率每年增加5％-7％。甲状腺自身免疫反应的机制是激活的甲状腺抗原特异性T辅助细胞诱导B细胞分泌甲状腺自身抗体，其中甲状腺球蛋白抗体(TGAb)是HT的标志性抗体之一，目前检测的主要为总IgG类抗体。甲状腺球蛋白(TG)其主要作用是储存和合成甲状腺激素，是一种潜在的自身抗原，当进入血液后可刺激机体产生TGAb，TGAb是甲状腺疾病中首先发现的自身抗体，具有高度种属特异性，可用于HT等甲状腺疾病的鉴别诊断。

研究发现血清TGAb浓度相同的不同患者甲状腺损伤程度及进展不同，仅检测TGAb水平很难评估病情严重程度。Li等学者发现TG IgG亚型(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)在不同甲状腺功能状态的HT患者中分布不同，高滴度IgG1亚型预示进展为甲减可能。不同HT患者TGIgG亚型(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)分布如何及与甲状腺功能损伤的进展具有怎样的联系，目前国内外相关报道较少，IgM的研究更少。IgG亚型及IgM检测方法主要为间接法酶联免疫分析(ELISA)，但ELISA法操作灵敏度、重复性和特异性较差，线性范围窄，且常会有一些相互矛盾的结果。

放射配体法(RBA)是利用放射性核素标记抗原或抗体，然后与被测的抗体或抗原结合，形成抗原抗体复合物的原理来进行检测的分析法。该方法灵敏度高、特异性强、精密度和准确度高，是医学研究的重要方法。因此，有必要开发高性能的RBA检测试剂盒取代ELISA法检测TG IgG各亚型或IgM。

发明内容

针对上述现有技术的不足，本发明的目的是提供一种甲状腺球蛋白IgM抗体的检测试剂盒。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种甲状腺球蛋白IgM抗体的检测试剂盒，包括：¹²⁵I标记的人甲状腺球蛋白，2-巯基吡啶琼脂糖。

进一步地，所述检测试剂盒还包括：TBST缓冲液和牛血清白蛋白。

更进一步地，所述检测试剂盒还包括：阳性质控血清和阴性质控血清。

该试剂盒将含有2-巯基吡啶配基的琼脂糖运用到已有的放射配体法(RBA)检测平台，以¹²⁵I同位素标记的甲状腺球蛋白(TG)作抗原与待测血清形成抗原抗体复合物，将2-巯基吡啶琼脂糖与抗原抗体复合物混合震荡，利用2-巯基吡啶可直接结合IgM的特点，反复洗涤，洗脱未结合的信号，读取余下抗原抗体复合物的放射性强度，从而计算出样品中IgM抗体的含量指数。

上述检测试剂盒在制备桥本甲状腺炎检测产品中的应用。