[发明专利]一种筛选不受补体干扰的单克隆抗体对的方法

说明书

本发明提供一种筛选不受补体干扰的单克隆抗体对的方法，包括以下步骤：S10：获得阴性样本混合物；S20：在阴性样本混合物中加入抗原，获得检测样本一；S30：对阴性样本混合物进行加热，并加入抗原，获得检测样本二；S40：在检测样本二中加入补体，获得检测样本三；S50：用待选单克隆抗体对制备的化学发光试剂，对检测样本一、检测样本二和检测样本三分别进行免疫化学发光检测，获得检测结果一、检测结果二、检测结果三；S60：根据检测结果一、检测结果二、检测结果三，获得不受补体干扰的单克隆抗体对。本发明解决了免疫诊断常常受到补体干扰，影响免疫检测的准确性的技术问题，实现了免疫诊断不易受补体干扰，提高免疫诊断准确性的技术效果。

技术领域

本发明涉及免疫检测技术领域，具体而言，涉及一种筛选不受补体干扰的单克隆抗体对的方法。

背景技术

免疫诊断特别是基于双抗体夹心的诊断技术，由于其灵敏度高、特异性强的特点，近年来飞速发展，如酶联免疫、免疫层析、化学发光检测技术等。尤其是免疫化学发光检测技术，由于其灵敏度高、速度快、自动化等优势，逐渐成为主要的临床诊断技术。但在临床应用中，免疫诊断常常受到样本中干扰物的影响。

样本中干扰物有类风湿因子(RF)、异嗜性抗体、自身抗体、补体、生物素、血脂、胆红素等，其中，补体是非常重要的一类干扰物。

目前还没有易行的、可以通用的解决补体干扰的方法。常见的，如53℃，10min加热样本灭活补体在临床上较难施行，用金属螯合剂乙二胺四乙酸(EDTA)、氨基三乙酸(NTA)等阻断补体激活级联反应则由于本身干扰抗原抗体反应或环保问题受限制。也有推荐使用禽类如鸡IgY抗体替代鼠、兔等来源的抗体可不受补体干扰，但禽类抗体目前使用非常少，也无法解决大量的免疫诊断需求所面临的补体干扰问题。

发明内容

本发明解决了免疫诊断常常受到补体干扰，影响免疫检测的准确性的技术问题，从诊断原料选择上减少受补体干扰的概率，实现了免疫诊断不易受补体干扰，提高免疫诊断准确性的技术效果。

为解决上述问题，本发明提供一种筛选不受补体干扰的单克隆抗体对的方法，包括以下步骤：S10：获得阴性样本混合物；S20：在阴性样本混合物中加入抗原，获得检测样本一；S30：对阴性样本混合物进行加热，并加入抗原，获得检测样本二；S40：在检测样本二中加入补体C1q，获得检测样本三；S50：用待选单克隆抗体对制备的化学发光试剂，对检测样本一、检测样本二和检测样本三分别进行免疫化学发光检测，获得检测结果一、检测结果二、检测结果三；S60：根据检测结果一、检测结果二、检测结果三，获得不受补体干扰的单克隆抗体对。

与现有技术相比，采用该技术方案所达到的技术效果：本发明提供的一种筛选不受补体干扰的单克隆抗体对的方法，通过对阴性样本混合物进行加热，能够对其补体进行灭活，进而检测样本一为非灭活样本，检测样本二为灭活样本，向灭活及非灭活样本中加入等量的待测物，用待选抗体对同时测试上述样本，计算补体灭活后测试结果变化，再向灭活及添加待测物的样本二中添加人C1q，即为检测样本三，再次测试C1q对测试结果的影响，从而确认易受补体干扰抗体对，同时筛选出不易受补体干扰的抗体对。本方法可以在免疫诊断的原料选择阶段筛选出不易受补体干扰的抗体对，在免疫诊断产品开发阶段减少受补体干扰的概率。

在本发明的一个实例中，S10包括以下步骤：S11：获取阴性样本；S12：测定阴性样本的C1q含量，获得检测结果；S13：根据检测结果，将阴性样本进行分类，并获得阴性样本混合物。

与现有技术相比，采用该技术方案所达到的技术效果：通过将阴性样本根据其C1q含量进行精细化分类，进而能够获得补体含量不同的阴性样本混合物，使得筛选结果更加准确，更具参考意义。