[发明专利]一种筛选不受补体干扰的单克隆抗体对的方法在审

专利信息
申请号: 202210292730.8 申请日: 2022-03-23
公开(公告)号: CN114594261A 公开(公告)日: 2022-06-07
发明(设计)人: 何进军;葛超坤;章成龙;贾江花;瑞亚·富兰克林·沃克曼;邹继华;叶邦策 申请(专利权)人: 美康生物科技股份有限公司
主分类号: G01N33/577 分类号: G01N33/577;G01N21/76
代理公司: 浙江中桓凯通专利代理有限公司 33376 代理人: 李美宝
地址: 315000 浙江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 筛选 不受 补体 干扰 单克隆抗体 方法
【权利要求书】:

1.一种筛选不受补体干扰的单克隆抗体对的方法,其特征在于,包括以下步骤:

S10:获得阴性样本混合物;

S20:在所述阴性样本混合物中加入抗原,获得检测样本一;

S30:对所述阴性样本混合物进行加热,并加入所述抗原,获得检测样本二;

S40:在所述检测样本二中加入补体C1q,获得检测样本三;

S50:用待选单克隆抗体对制备的化学发光试剂,对所述检测样本一、检测样本二和检测样本三分别进行免疫化学发光检测,获得检测结果一、检测结果二、检测结果三;

S60:根据所述检测结果一、所述检测结果二、所述检测结果三,获得所述不受补体干扰的单克隆抗体对。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述S10包括以下步骤:

S11:获取阴性样本;

S12:测定所述阴性样本的C1q含量,获得检测结果;

S13:根据所述检测结果,将所述阴性样本进行分类,并获得所述阴性样本混合物。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述将所述阴性样本进行分类,并获得阴性样本混合物包括以下步骤:

S14:将C1q含量大于220μg/mL的所述阴性样本混合标记为高补体阴性样本混合物,C1q大于170μg/mL且小于220μg/mL的所述阴性样本混合标记为中补体阴性样本混合物,C1q小于170μg/mL的所述阴性样本混合标记为低补体阴性样本混合物。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述对所述阴性样本混合物进行加热,加热温度为50-55℃,加热时间为10-15min。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述S60包括以下步骤:

S61:根据所述检测结果一、所述检测结果二、所述检测结果三,计算变化比例,在所述检测结果一和所述检测结果二的变化比例的差值小于10%,且所述检测结果二和所述检测结果三的变化比例的差值小于10%的情况下,所述待选单克隆抗体对不受所述补体影响;

S62:获得所述不受补体干扰的单克隆抗体对。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述检测样本一和所述检测样本二中的所述阴性样本混合物、所述抗原的添加量相同。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述S40之前包括以下步骤:

S31:收集血清;

S32:纯化所述血清中的C1q,获得粗纯品;

S33:进一步纯化所述粗纯品,获得补体C1q。

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述S40包括以下步骤:

S41:在所述检测样本二中加入所述补体C1q,获得所述检测样本三。

9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述免疫化学发光检测包括以下步骤:

S44:制备发光试剂;

S45;制备固相试剂;

S46:将所述发光试剂、所述固相试剂分别与所述检测样本一、所述检测样本二、所述检测样本三进行混合,利用化学发光免疫分析仪进行检测。

10.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述测定所述阴性样本的C1q含量采用补体C1q诊断试剂盒。

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