[发明专利]一种筛选不受补体干扰的单克隆抗体对的方法在审
申请号: | 202210292730.8 | 申请日: | 2022-03-23 |
公开(公告)号: | CN114594261A | 公开(公告)日: | 2022-06-07 |
发明(设计)人: | 何进军;葛超坤;章成龙;贾江花;瑞亚·富兰克林·沃克曼;邹继华;叶邦策 | 申请(专利权)人: | 美康生物科技股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N21/76 |
代理公司: | 浙江中桓凯通专利代理有限公司 33376 | 代理人: | 李美宝 |
地址: | 315000 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 筛选 不受 补体 干扰 单克隆抗体 方法 | ||
1.一种筛选不受补体干扰的单克隆抗体对的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S10:获得阴性样本混合物;
S20:在所述阴性样本混合物中加入抗原,获得检测样本一;
S30:对所述阴性样本混合物进行加热,并加入所述抗原,获得检测样本二;
S40:在所述检测样本二中加入补体C1q,获得检测样本三;
S50:用待选单克隆抗体对制备的化学发光试剂,对所述检测样本一、检测样本二和检测样本三分别进行免疫化学发光检测,获得检测结果一、检测结果二、检测结果三;
S60:根据所述检测结果一、所述检测结果二、所述检测结果三,获得所述不受补体干扰的单克隆抗体对。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述S10包括以下步骤:
S11:获取阴性样本;
S12:测定所述阴性样本的C1q含量,获得检测结果;
S13:根据所述检测结果,将所述阴性样本进行分类,并获得所述阴性样本混合物。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述将所述阴性样本进行分类,并获得阴性样本混合物包括以下步骤:
S14:将C1q含量大于220μg/mL的所述阴性样本混合标记为高补体阴性样本混合物,C1q大于170μg/mL且小于220μg/mL的所述阴性样本混合标记为中补体阴性样本混合物,C1q小于170μg/mL的所述阴性样本混合标记为低补体阴性样本混合物。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述对所述阴性样本混合物进行加热,加热温度为50-55℃,加热时间为10-15min。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述S60包括以下步骤:
S61:根据所述检测结果一、所述检测结果二、所述检测结果三,计算变化比例,在所述检测结果一和所述检测结果二的变化比例的差值小于10%,且所述检测结果二和所述检测结果三的变化比例的差值小于10%的情况下,所述待选单克隆抗体对不受所述补体影响;
S62:获得所述不受补体干扰的单克隆抗体对。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述检测样本一和所述检测样本二中的所述阴性样本混合物、所述抗原的添加量相同。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述S40之前包括以下步骤:
S31:收集血清;
S32:纯化所述血清中的C1q,获得粗纯品;
S33:进一步纯化所述粗纯品,获得补体C1q。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述S40包括以下步骤:
S41:在所述检测样本二中加入所述补体C1q,获得所述检测样本三。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述免疫化学发光检测包括以下步骤:
S44:制备发光试剂;
S45;制备固相试剂;
S46:将所述发光试剂、所述固相试剂分别与所述检测样本一、所述检测样本二、所述检测样本三进行混合,利用化学发光免疫分析仪进行检测。
10.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述测定所述阴性样本的C1q含量采用补体C1q诊断试剂盒。
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