[发明专利]一种提高细菌进入活的非可培养状态比例的方法

说明书

本发明提出了一种提高细菌进入活的非可培养状态比例的方法，所述方法包括：将目的细菌进行预处理，得到预处理后的目的细菌；将所述预处理后的目的细菌进行高压二氧化碳处理，以便使所述预处理后的目的细菌进入活的非可培养状态；其中，所述预处理包括酸处理和/或热处理。利用本发明的方法可以快速获得大量活的非可培养状态的细菌，有助于对活的非可培养状态的细菌的研究，应用前景好。

技术领域

本发明涉及食品生物领域。具体地，本发明涉及一种提高细菌进入活的非可培养状态比例的方法。

背景技术

研究发现，细菌在外界环境的刺激下，生命体征会发生改变，进入一种特殊的自我保护生存状态—活的非可培养状态（Viable But Nonculturable State，VBNC)。处于该状态下，细菌体积不断缩小，表面积与体积之比扩大，提高了对营养物质的亲和力，不但可以忍受饥饿的营养环境，而且增强了对其他环境胁迫因子如防腐剂、温度冲击、氧化环境、渗透压改变等的保护能力。处于VBNC状态下的细菌，其最大的特点就是丧失了平板上的生长繁殖能力，但生命体征是活的，并且保留原菌的毒力和致病性。所以，VBNC状态的细菌在适合生长条件下能够恢复生长繁殖，很快达到致病剂量，成为逃避检测的“隐性传染源”，对安全构成潜在威胁。开展有关活的非可培养状态细菌的特征及形成机制等方面的研究对有效杀灭活的非可培养状态细菌至关重要。但由获得的非可培养菌含量少、纯度低等原因，限制了获得活的非可培养菌的研究。

因此，目前提高细菌进入活的非可培养状态比例以获得大量活的非可培养状态细菌的方法仍有待研究。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。为此，本发明提出了一种可提高细菌进入活的非可培养状态比例的方法，利用该方法可以快速获得大量活的非可培养状态的细菌，有助于对活的非可培养状态的细菌的研究，应用前景好。

本发明提出了一种提高细菌进入活的非可培养状态比例的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将目的细菌进行预处理，得到预处理后的目的细菌；将所述预处理后的目的细菌进行高压二氧化碳处理，以便使所述预处理后的目的细菌进入活的非可培养状态；其中，所述预处理包括酸处理和/或热处理。

前期研究发现，通过对细菌进行高压二氧化碳处理，可以诱导其进入活的非可培养状态，但是获得的活的非可培养状态的细菌比例较低，无法较好地满足对活的非可培养菌的纯度要求。进而，发明人经过大量实验发现，在进行高压二氧化碳处理之前，预先将细菌进行酸处理和/或热处理，可以有效地诱导细菌进入活的非可培养状态，使得最终处理后所得总细菌中活的非可培养状态菌的数量占总细菌数量的比例提高，从而提高活的非可培养菌的得率，有助于对活的非可培养状态的细菌的研究，应用前景好。

根据本发明的实施例，所述提高细菌进入活的非可培养状态比例的方法还可以具有下列附加技术特征：

根据本发明的实施例，所述酸处理是在pH值为3.5~5.5的条件下进行2~6小时。发明人经过大量实验得到上述较佳处理条件，由此，既可以高效诱导细菌进入活的非可培养状态，又可以避免酸处理过程中细菌因活性过低而造成死亡或者进入活的非可培养状态后无法恢复到可培养状态。具体地，酸处理是在常温常压下进行的。

根据本发明的实施例，所述酸处理是将所述目的细菌置于酸液中进行的，所述酸液是将生理盐水溶液用盐酸调整pH值为3.5~5.5。采用上述酸液既可以提供酸性条件，也可以避免酸处理过程中细菌因活性过低而造成死亡。

根据本发明的实施例，所述热处理是在42~60℃下进行2~6小时。发明人经过大量实验得到上述较佳处理条件，由此，既可以高效诱导细菌进入活的非可培养状态，又可以避免热处理过程中细菌因活性过低而造成死亡或者进入活的非可培养状态后无法恢复到可培养状态。