[发明专利]一种应用于烟草育苗期TMV钝化的钝化剂及其应用

说明书

本发明公开了一种应用于烟草苗期TMV钝化的钝化剂及其应用，所述钝化剂以脱脂牛奶和磷酸三钠为主要活性成分制得，通过枯斑法测定脱脂牛奶和磷酸三钠两者复配制剂对烟草漂浮育苗过程中被TMV污染的基质及剪叶器的钝化作用，并利用透射电镜观察钝化剂对病毒粒体的影响，同时采用实时qPCR对TMV含量以及寄主防御蛋白相对表达量进行定量检测。结果显示，不同浓度稀释液可显著钝化基质中的TMV，抑制TMV对烟苗的侵染和发病率，基质中TMV的含量下降74.09％‑90.26％，相对防效达54.83％‑85.45％。

技术领域

本发明属于烟草病害防治领域，具体地提供了一种应用于烟草苗期TMV钝化的钝化剂及其应用，所述钝化剂以脱脂牛奶和磷酸三钠为主要活性成分制得。

背景技术

烟草漂浮育苗技术已在国内烟叶生产过程中广泛应用。烟草花叶病毒(TMV)引起的病毒病已成为育苗期的主要病害，易通过剪叶等农事操作迅速传播，造成大量移栽苗的隐症带毒，以及移栽后大田花叶病的大面积发生。研究表明，病残体、育苗盘、基质及剪叶工具等是TMV传播的重要初侵染源。目前漂浮育苗过程中消毒措施主要是利用消毒剂对多孔育苗盘、育苗池和剪叶工具进行清洗和消毒。生产上常用消毒药剂很多，主要有含氯化合物、氧化剂和铜制剂等，但消毒方法和消毒效果报道不一，且易造成烟苗药害、环境污染以及工作人员呼吸不适和皮肤灼伤等问题。近期研究表明，生物制剂可用于育苗棚、剪叶机械、基质及育苗盘中烟苗残留干叶及干根中的TMV钝化，但生物制剂受有机质的影响较大。筛选安全、高效的消毒剂对育苗期TMV的防控具有重要意义。

脱脂牛乳对番茄黄化花叶病毒和烟草花叶病毒均有钝化作用，抑制其复制增殖，并降低病毒的侵染能力。此外，脱脂牛乳具有诱导烟草寄主抗TMV的作用。磷酸三钠对TMV和其他病原菌具有较好的杀灭效果，常被用于洗手消毒液、种子处理剂和植物病毒污染工具的消毒剂中，且药液稳定，持效期长，消毒效果不受有机物的影响。但目前尚没有两者合用的记载。

发明内容

一方面，本申请提供了应用于烟草苗期TMV钝化的钝化剂，其包含脱脂牛奶和磷酸三钠。

进一步地，所述钝化剂中脱脂牛奶的含量为2-15％，所述磷酸三钠的含量为2-10％。

进一步地，所述钝化剂中脱脂牛奶的含量为10％，所述磷酸三钠的含量为3％。

进一步地，所述钝化剂中还包含吐温。

进一步地，所述钝化剂中还包含0.1％吐温20。

另一方面，本申请提供了上述钝化剂用于钝化烟草育苗期TMV的应用。

另一方面，本申请提供了上述钝化剂用于诱导烟草防御基因NPR1、PAL、PR1b和PR1a表达的用途。

进一步地，钝化剂500-1000倍稀释后应用。

进一步地，钝化剂500倍稀释后应用。

进一步地，所述应用中使用钝化剂处理1分钟以上。

本申请的钝化剂可用于钝化处理剪叶器具和育苗基质等育苗过程中所用工具或材料。

有益效果：

(1)本发明的钝化剂稀释液共孵育后的病毒粒体断裂成微小片段，外壳蛋白受损严重，螺旋结构和柱状基本消损完。

(2)本发明的钝化剂稀释液喷施不会对烟苗造成药害，适合实际生产中应用。

(3)本发明的钝化剂可以提高防御酶PPO和PAL的活性，对烟草POD酶也具有活性提高作用。

附图说明

图1为不同稀释倍数的钝化剂对TMV的钝化作用；

图2为不同浓度钝化剂溶液处理20min的病毒立体投射电镜图像；