[发明专利]一种双试剂钾检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种双试剂钾检测试剂盒及其检测方法。本发明通过调整试剂1与试剂2的体积比4‑9:6，试剂的稳定性得到提升、无需每天定标，测定可在全自动生化分析仪上进行。

技术领域

本发明属于临床生化分析领域，具体涉及血清中钾离子检测试剂盒及其检测方法。

背景技术

电解质钾、钠、钙、氯等为人体细胞组成一个较为恒定的理化环境，维持着人体的生命活动。人体内的钾是维持细胞生理活动的主要阳离子，是细胞内液的重要电解质。钾离子大部分(98％)存在于细胞内，少量存在于细胞外液，且浓度恒定。

钾离子在保持机体的正常渗透压及酸碱平衡、参与糖及蛋白代谢、保证神经肌肉的正常功能等方面具有重要作用。虽然血清钾测定实为细胞外液钾离子测定，但体内的钾离子经常不断地在细胞内与体液之间互相交换，以保持动态平衡。因此血清钾浓度的高低，在一定程度上也可间接地反映细胞内钾的水平。

血清钾是医学界公认的检验危急值项目，具有非常重要的临床意义。

血清钾测定方法主要有火焰光度法、离子选择电极法(ISE)、酶法、放射性核素稀释-质谱法(ID-ms)和中子活化法，其中决定性方法为放射性核素稀释-质谱法(ID-ms)和中子活化法，国际临床生化联合会推荐的参考方法为火焰光度法。火焰光度法、放射性核素稀释-质谱法(ID-ms)和中子活化法虽然结果准确，干扰因素少，但设备复杂，费用昂贵，不适合常规实验和自动分析。

目前临床上测定钾应用较普遍的离子选择电极法、酶法各有缺点。离子选择电极法理想的情况是，每个电极都具有单离子选择性，使电极只对一种离子有反应。实际情况却不是这样，所有的离子选择电极都存在有干扰离子。况且，尽管能对离子特异性电极进行校正，但通常特异性仍不是绝对的，所以用电极法测得的结果也不是十分准确。而且测定成本也比较高，尤其是辅助材料及仪器比较昂贵。八十年代末，Berry等建立的血清钾离子的酶学测定方法已用于临床实验室，其原理在于：许多离子都有激活酶的作用。钾离子的测定是通过钾依赖性丙酮酸激酶(PK)催化磷酸烯醇丙酮酸(PEP)与二磷酸腺苷(ADP)生成丙酮酸和三磷酸腺苷(ATP)，再在乳酸脱氢酶(LDH)催化下，所生成的丙酮酸和NADH反应，生成乳酸和NAD⁺，在340nm处吸光值下降与钾离子浓度呈正比。酶法检测血清钾离子的优点在于可以使用全自动生化分析仪，不需要专门的仪器和相应的耗材，因此，大大的降低了检测的成本。在国家药品监督管理局网站查询可知已经有数十个厂家的酶法钾试剂盒获得注册证。

需要说明的是，目前酶法检测血清钾离子一个重要的缺点是通常需要每天都进行定标，这表明试剂的稳定性存在不足，导致使用上的不便和校准品的消耗。

因此，改善酶法钾试剂的稳定性可提高检测方法的可靠性和便利性，使之更符合临床需求。

发明内容

为克服现有技术中的问题，本发明的目的是提供一种可以克服现有技术缺陷的酶法血清钾离子检测试剂盒，以及应用该试剂盒测定血清钾离子含量的方法。本发明通过调整试剂1与试剂2的体积比到特定的范围内，获得的结果试剂的稳定性得到提升、无需每天定标，测定可在全自动生化分析仪上进行。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

第一方面，提供一种血清钾离子酶法检测试剂，其包含以下成分：