[发明专利]一种广谱中和抗体活性的检测方法在审

专利信息
申请号: 202210254500.2 申请日: 2022-03-15
公开(公告)号: CN114778822A 公开(公告)日: 2022-07-22
发明(设计)人: 赵晓宇;崔雨辰 申请(专利权)人: 苏州复因普肽生物科技有限公司
主分类号: G01N33/536 分类号: G01N33/536;G01N33/543;G01N33/561;G01N33/58;G01N33/60;G01N33/68;G01N33/80
代理公司: 苏州久元知识产权代理事务所(普通合伙) 32446 代理人: 潘宏伟
地址: 215000 江苏省苏州市高新*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 广谱 中和 抗体 活性 检测 方法
【说明书】:

发明公开了一种广谱中和抗体活性的检测方法,包括以下步骤:沉淀反应:通过抗原抗体特异性结合形成可见的免疫复合物,根据沉淀反应阳性判定结果,凝集试验:通过细菌、红细胞等颗粒状抗原与相应抗体结合后形成的凝集现象进行抗体检测,补体结合试验:通过利用抗原抗体复合物与补体进行结合;本发明通过设置沉淀反应、凝集试验、补体结合试验、标记免疫测定和免疫印记法的方法流程,解决了目前广谱中和抗体活性的检测方法难以保证检测结果的准确性和可靠性,从而造成检测结果不准确的问题,该广谱中和抗体活性的检测方法,具备能够有效保证检测结果的准确性和可靠性,从而提高了检测结果准确的优点。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域,具体为一种广谱中和抗体活性的检测方法。

背景技术

抗体是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。它免是一种由浆细胞分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为抗原,抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。抗体按其反应形式分为凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、调理素、中和抗体、补体结合抗体等。按抗体产生的来源分为正常抗体,如血型ABO型中的抗A和抗B的抗体,和免疫抗体如抗微生物的抗体。按反应抗原的来源分为异种抗体,异嗜性抗体,同种抗体和自身抗体。按抗原反应的凝集状态分为完全抗体IgM和不完全抗体IgG等。抗体在医疗实践中应用甚为广泛。如用于疾病的预防、诊断和治疗方面都有一定的作用。临床上用丙种球蛋白预防病毒性肝炎、麻疹、风疹等,国际上用抗Rh免疫球蛋白预防因Rh血型不合引起的溶血症。诊断上如类风湿因子用于类风湿性关节炎,抗核抗体(ANA)、抗DNA抗体用于系统性红斑狼疮,抗精子抗体用于原发性不孕症的诊断等;治疗上如毒素中毒用抗毒治疗以及免疫缺陷性疾病的治疗等。目前广谱中和抗体活性的检测方法难以保证检测结果的准确性和可靠性,从而造成检测结果不准确,为此提出一种广谱中和抗体活性的检测方法,来解决此问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种广谱中和抗体活性的检测方法,解决了目前广谱中和抗体活性的检测方法难以保证检测结果的准确性和可靠性,从而造成检测结果不准确的问题。

为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种广谱中和抗体活性的检测方法,包括以下步骤:

步骤1:沉淀反应:通过抗原抗体特异性结合形成可见的免疫复合物,根据沉淀反应阳性判定结果;

步骤2:凝集试验:通过细菌、红细胞等颗粒状抗原与相应抗体结合后形成的凝集现象进行抗体检测;

步骤3:补体结合试验:通过利用抗原抗体复合物与补体进行结合,将已知浓度的补体消耗使得浓度减低,从而达到进行抗体检测的目的;

步骤4:标记免疫测定:包括酶联免疫法、放射免疫法、荧光免疫法等;

步骤5:免疫印记法:主要检测蛋白质特性、表达与分布的方法,帮助判断是否产生病毒特异抗体。

优选的,所述步骤2中,出现凝集反应则为阳性。

优选的,所述步骤3中,补体测定方法有溶血活性测定、旁路途径溶血活性测定、C3蛋白含量测定和C3裂解产物测定。

优选的,所述步骤3中,补体溶血活性测定,用于测定补体传统活化途径Cp的溶血活性。

优选的,所述步骤3中,原理是被测血清中补体可使抗体致敏的绵羊红细胞溶解,溶血程度与补体量呈正相关。补体量以CH50单位/ml表示,正常值170±70单位/ml。

优选的,所述步骤3中,旁路途径溶血活性测定,参与Ap的除C5~C9外,主要有C3、B因子、D因子、C3灭活剂、备解素等6个成分,正常值为21.7±5.4单位/ml。

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