[发明专利]一种广谱中和抗体活性的检测方法在审
申请号: | 202210254500.2 | 申请日: | 2022-03-15 |
公开(公告)号: | CN114778822A | 公开(公告)日: | 2022-07-22 |
发明(设计)人: | 赵晓宇;崔雨辰 | 申请(专利权)人: | 苏州复因普肽生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/536 | 分类号: | G01N33/536;G01N33/543;G01N33/561;G01N33/58;G01N33/60;G01N33/68;G01N33/80 |
代理公司: | 苏州久元知识产权代理事务所(普通合伙) 32446 | 代理人: | 潘宏伟 |
地址: | 215000 江苏省苏州市高新*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 广谱 中和 抗体 活性 检测 方法 | ||
1.一种广谱中和抗体活性的检测方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤1:沉淀反应:通过抗原抗体特异性结合形成可见的免疫复合物,根据沉淀反应阳性判定结果;
步骤2:凝集试验:通过细菌、红细胞等颗粒状抗原与相应抗体结合后形成的凝集现象进行抗体检测;
步骤3:补体结合试验:通过利用抗原抗体复合物与补体进行结合,将已知浓度的补体消耗使得浓度减低,从而达到进行抗体检测的目的;
步骤4:标记免疫测定:包括酶联免疫法、放射免疫法、荧光免疫法等;
步骤5:免疫印记法:主要检测蛋白质特性、表达与分布的方法,帮助判断是否产生病毒特异抗体。
2.根据权利要求1所述的一种广谱中和抗体活性的检测方法,其特征在于:所述步骤2中,出现凝集反应则为阳性。
3.根据权利要求1所述的一种广谱中和抗体活性的检测方法,其特征在于:所述步骤3中,补体测定方法有溶血活性测定、旁路途径溶血活性测定、C3蛋白含量测定和C3裂解产物测定。
4.根据权利要求1所述的一种广谱中和抗体活性的检测方法,其特征在于:所述步骤3中,补体溶血活性测定,用于测定补体传统活化途径Cp的溶血活性。
5.根据权利要求1所述的一种广谱中和抗体活性的检测方法,其特征在于:所述步骤3中,原理是被测血清中补体可使抗体致敏的绵羊红细胞溶解,溶血程度与补体量呈正相关。补体量以CH50单位/ml表示,正常值170±70单位/ml。
6.根据权利要求1所述的一种广谱中和抗体活性的检测方法,其特征在于:所述步骤3中,旁路途径溶血活性测定,参与Ap的除C5~C9外,主要有C3、B因子、D因子、C3灭活剂、备解素等6个成分,正常值为21.7±5.4单位/ml。
7.根据权利要求1所述的一种广谱中和抗体活性的检测方法,其特征在于:所述步骤3中,C3蛋白含量测定,C3是补体Cp与Ap两条活化途径的交汇点,在整个补体系统中地位十分重要。
8.根据权利要求1所述的一种广谱中和抗体活性的检测方法,其特征在于:所述步骤3中,测定C3含量常用单向免疫扩散法、火箭电泳法或免疫比蚀法,这些方法均需抗C3血清,正常值129±20mg/dl。
9.根据权利要求1所述的一种广谱中和抗体活性的检测方法,其特征在于:所述步骤3中,C3裂解产物测定,补体经Cp或Ap活化时,形成的C3转化酶可将C3裂解为C3d等活性断片,即C3Sp。
10.根据权利要求1所述的一种广谱中和抗体活性的检测方法,其特征在于:所述步骤3中,双向免疫电泳法操作较繁琐,敏感性不高,对流免疫电泳法操作简便、快速、敏感,仅须抗天然C3血清即可,C3d的正常值为0.8±0.5mg/dl。
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