[发明专利]抗AFP抗原VHH结构域及含有其的双特异性抗体有效
| 申请号： | 202210248742.0 | 申请日： | 2022-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN114773478B | 公开（公告）日： | 2023-05-23 |
| 发明（设计）人： | 宋海鹏;刘原源;于建立;曹慧;古一;李飞;张霞;蒋立仲;王准;宋亮 | 申请（专利权）人： | 深圳市国创纳米抗体技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/30 | 分类号： | C07K16/30;C12N15/13;C12N15/70;C12N1/21;C07K16/46;C12N15/85;C12N5/10;A61K39/395;A61P35/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京市众天律师事务所 11478 | 代理人： | 李新军 |
| 地址： | 518110 广东省深圳市龙华区观澜*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | afp 抗原 vhh 结构 含有 特异性 抗体 | ||
1. 一种抗AFP抗原的VHH结构域，其特征在于，所述VHH结构域的3个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3分别为SEQ ID NO.1的第26-33、51-57、96-111位氨基酸序列所示，或者如SEQ IDNO.3的第26-33、51-57、96-111位氨基酸序列所示。
2. 根据权利要求1所述的VHH结构域，其特征在于，所述VHH结构域的序列如SEQ IDNO.1或者SEQ ID NO.3的氨基酸序列所示。
3. 一种含有权利要求1或2所述VHH结构域的抗体，其特征在于，所述抗体的恒定区氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。
4. 一种编码权利要求2所述VHH结构域序列的核酸，其特征在于，所述核酸的序列由SEQ ID NO.2或者SEQ ID NO.4所示。
5.一种含有权利要求4所述的核酸的表达载体，其特征在于，所述载体为pMES4。
6.一种含有权利要求5所述表达载体的宿主细胞，其特征在于，所述细胞为大肠杆菌BL21（DE3）。
7. 一种双特异性抗体，其特征在于，所述抗体含有两条序列不同的重链，所述两条序列不同的重链的氨基酸序列由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列与SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列串联而成，由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列位于串联的氨基端。
8.根据权利要求7所述的双特异性抗体，其特征在于，所述两条序列不同的重链之间设有连接肽，所述连接肽为（G4S）n，其中，n为1-6之间的整数。
9. 根据权利要求8所述的双特异性抗体，其特征在于，所述n=4，所述双特异性抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。
10. 根据权利要求9所述的双特异性抗体，其特征在于，在所述双特异性抗体的羧基端还带有抗体恒定区，其恒定区氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。
11. 一种编码权利要求9所述抗体的核酸，其特征在于，所述核酸的序列由SEQ IDNO.7所示。
12. 一种含有权利要求11所述核酸的表达载体，其特征在于，所述载体为pFUSEhIgG1-Fc2。
13.一种含有权利要求12所述表达载体的宿主细胞，其特征在于，所述细胞为HEK293细胞。
14.权利要求3所述抗体在制备肿瘤治疗药物中的应用。
15.权利要求7-10任一所述抗体在制备肿瘤治疗药物中的应用。
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