[发明专利]负载小干扰RNA的可电荷反转光热纳米粒子及其制备和应用

权利要求书

1.一种负载小干扰RNA的可电荷反转光热纳米粒子，包括由B型明胶包裹的聚吡咯纳米粒子，其外层吸附聚乙烯亚胺-聚乙二醇2000，最外层吸附小干扰RNA；其特征在于，吸附了聚乙烯亚胺-聚乙二醇2000的B型明胶包裹的聚吡咯纳米粒子和小干扰RNA之间的质量比为80:1 ~100:1；所述小干扰RNA是整合素连接酶小干扰RNA。

2.如权利要求1所述的光热纳米粒子，其特征在于，所述聚乙烯亚胺为分子量20000~30000的分枝状聚乙烯亚胺，其经聚乙二醇2000修饰得到所述的聚乙烯亚胺-聚乙二醇2000。

3.如权利要求1所述的光热纳米粒子，其特征在于，所述光热纳米粒子的平均粒径为50-60纳米。

4.权利要求1~3任意一项所述负载小干扰RNA的可电荷反转光热纳米粒子的制备方法，包括以下步骤：

1) 将B型明胶溶于去离子水中，然后加入六水合三氯化铁搅拌溶解；

2) 将步骤1）所得溶液在4℃预冷，在搅拌过程中将吡咯单体逐滴加入，溶液逐渐变为黑色，继续搅拌20~24小时；

3) 离心收集产物，冻干，获得明胶包覆的聚吡咯纳米粒子粉末；

4) 取步骤3）获得的冻干粉末溶于pH 7.0~7.4的缓冲液中，同时将聚乙烯亚胺-聚乙二醇2000溶于pH 7.0~7.4的缓冲液中，将二者混合震荡一段时间，在明胶包裹的聚吡咯纳米粒子外层吸附上聚乙烯亚胺-聚乙二醇2000，离心后得到聚吡咯-聚乙烯亚胺纳米粒子；

5) 将小干扰RNA与聚吡咯-聚乙烯亚胺纳米粒子在pH 7.0~7.4的缓冲液中混合震荡一段时间，得到聚吡咯-聚乙烯亚胺- RNA纳米粒子，即为负载小干扰RNA的可电荷反转光热纳米粒子。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤1）中，在50~60℃用去离子水溶解B型明胶，获得浓度为0.008~0.012 g/mL的明胶溶液，然后冷却至室温，加入六水合三氯化铁搅拌溶解，其中六水合三氯化铁的终浓度为0.015~0.018 g/mL；步骤2）中按质量计，B型明胶和吡咯单体的用量比是3.5:1~4:1。

6.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤4）和步骤5）中所述pH 7.0~7.4的缓冲液为PBS、HBS或生理盐水；在步骤4）中，明胶包裹的聚吡咯纳米粒子粉末和聚乙烯亚胺-聚乙二醇2000的质量比为1:1.5~1:2。

7.权利要求1~3任意一项所述的负载小干扰RNA的可电荷反转光热纳米粒子在制备治疗和/或预防癌症的药物中的应用，其特征在于，所述小干扰RNA是整合素连接酶小干扰RNA，所述癌症为甲状腺乳头状癌。