[发明专利]Rassf6作为阿尔茨海默病标志物的应用在审
| 申请号: | 202210240012.6 | 申请日: | 2022-03-10 |
| 公开(公告)号: | CN114814232A | 公开(公告)日: | 2022-07-29 |
| 发明(设计)人: | 邓文斌;陈春霞;郭莹 | 申请(专利权)人: | 中山大学·深圳;中山大学 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;A61K35/30;A61P25/28;C12N5/0793 |
| 代理公司: | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人: | 李海恬 |
| 地址: | 518000 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | rassf6 作为 阿尔茨海默病 标志 应用 | ||
1.Rassf6作为疾病标志物在制备用于诊断和/或治疗阿尔茨海默病试剂和/或药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述阿尔茨海默病具有携带CLU位点突变的特点。
3.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述药物通过抑制Rassf6-Hippo信号通路改善阿尔茨海默病。
4.一种用于检测阿尔茨海默病的试剂盒,其特征在于,包括用于检测生物样本中Rassf6含量的试剂。
5.Rassf6抑制剂在制备用于改善于阿尔茨海默病药物中的用途。
6.根据权利要求5所述的用途,其特征在于,所述Rassf6抑制剂为γ-氨基丁酸能神经前体细胞。
7.一种药物组合物,其特征在于,包括γ-氨基丁酸能神经前体细胞,以及药学上可接受的辅料。
8.根据权利要求7所述的药物组合物,其特征在于,所述γ-氨基丁酸能神经前体细胞通过以下方法制备得到:
取健康人外周血样本,分离得到单核细胞;并将上述单核细胞扩增培养,加入OCT3/4、SOX2、KLF4、c-MYC和仙台病毒进行转染,并以神经前体细胞培养基培养,得到人源性诱导型神经前体细胞,再给予γ-氨基丁酸能神经前体细胞培养基进行培养,使细胞向MGE分化,即得所述γ-氨基丁酸能神经前体细胞。
9.权利要求7或8所述的药物组合物的制备方法,其特征在于,包括以下γ-氨基丁酸能神经前体细胞的制备方法:
取健康人外周血样本,分离得到单核细胞;并将上述单核细胞扩增培养,加入OCT3/4、SOX2、KLF4、c-MYC和仙台病毒进行转染,并以神经前体细胞培养基培养,得到人源性诱导型神经前体细胞,再给予γ-氨基丁酸能神经前体细胞培养基进行培养,使细胞向MGE分化,即得所述γ-氨基丁酸能神经前体细胞。
10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,所述γ-氨基丁酸能神经前体细胞的制备方法为:
取健康人外周血样本,分离得到单核细胞;并将上述单核细胞以0.5-1×106密度接种至单核细胞扩增培养基,细胞扩增至14±1天时,加入浓度为(2±0.2)×105CIU/mL的OCT3/4、浓度为(2±0.2)×105CIU/mL的SOX2、浓度为(2±0.2)×105CIU/mL的KLF4、浓度为(2±0.2)×105CIU/mL的c-MYC和浓度为(2±0.2)×105CIU/mL的仙台病毒进行转染,转染第3±0.5天时,换为神经前体细胞培养基培养,培养约21±1天时得到人源性诱导型神经前体细胞,更换为γ-氨基丁酸能神经前体细胞培养基DMEM/F12进行培养,并加入NEAA、N2、SHH激动剂,使细胞向MGE分化,分化培养至第6±1天时,更换为DMEM/F12培养基,并加入1×1NEAA、1×N2、1×B27、Pur,继续分化培养9±1天,即得所述γ-氨基丁酸能神经前体细胞。
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