[发明专利]光致发光-多声子共振拉曼散射双模纳米探针及其应用

权利要求书

1.一种光致发光-多声子共振拉曼散射双模纳米探针，它是由下述方法制备的：

1）将半导体纳米粒子分散在超纯水中，加入偶联剂溶液，室温下避光磁搅0.5~1.5h；磁力搅拌结束后，在4000~6000 rpm下离心8~15 min，离心3次；弃上清，水洗产物，并将其分散在的Tris缓冲溶液中，得到分散液；

2）向步骤1）所述的分散液中加入待测物相对应的蛋白质分子、适配体分子、核酸分子或肽分子溶液，室温、避光孵育1.5~2.5 h，7500~8500 rpm下离心15~25 min，收集产物，得到光致发光-多声子共振拉曼散射双模纳米探针。

2.根据权利要求1所述的光致发光-多声子共振拉曼散射双模纳米探针，其特征在于：步骤1）所述的半导体纳米粒子为ZnTe、ZnS、CdS、ZnSe或CdSe；偶联剂为戊二醛或EDC/NHS。

3.根据权利要求2所述的光致发光-多声子共振拉曼散射双模纳米探针，其特征在于：步骤2）所述的待测物相对应的蛋白质分子、适配体分子、核酸分子或肽分子为山羊抗人IgG、癌胚抗原抗体、甲胎蛋白抗体或与miRNA分子碱基互补的单链DNA分子。

4.根据权利要求3所述的光致发光-多声子共振拉曼散射双模纳米探针，其特征在于：所述的半导体纳米粒子为ZnTe，它是由下述方法制备的：将锌源和亚碲酸钠粉末溶解在超纯水中，磁力搅拌至粉末完全溶解，逐滴加入浓度为1 mol/L的氢氧化钠溶液，然后加入硼氢化钠粉末，室温磁力搅拌10 min，得到有白色浑浊的前驱体溶液；所得溶液在200℃下反应2 h；反应结束后，冷却至室温，离心，水洗，收集砖红色沉淀，得到ZnTe纳米粒子；所述的锌源、亚碲酸钠和硼氢化钠的摩尔质量比为1.1:1:4。

5.根据权利要求3所述的光致发光-多声子共振拉曼散射双模纳米探针，其特征在于：所述的半导体纳米粒子为ZnS或CdS，它是由下述方法制备的：将锌源或镉源和九水合硫化钠粉末溶解在超纯水中，加入巯基丙酸，室温磁力搅拌，逐滴加入浓度为1 mol/L的氢氧化钠溶液；所得溶液在180℃下反应2 h；反应结束后，冷却至室温，离心，水洗，收集沉淀，得到ZnS或CdS纳米粒子；所述的锌源或镉源和九水合硫化钠的摩尔质量比为1:1。

6.根据权利要求3所述的光致发光-多声子共振拉曼散射双模纳米探针，其特征在于：所述的半导体纳米粒子为ZnSe或CdSe，它是由下述方法制备的：将锌源或镉源粉末溶解在超纯水中，加入表面修饰剂，室温磁力搅拌，逐滴加入浓度为1mol/L的氢氧化钠溶液；将硒粉分散在超纯水中，加入硼氢化钠粉末，氮气氛围中反应得到硒氢化钠前驱体溶液；将所得硒氢化钠前驱体溶液加入上述锌或镉溶液中，混合溶液在100℃下，氮气氛围中反应2h；反应结束后，冷却至室温，离心，水洗，收集沉淀，得到ZnSe或CdSe纳米粒子；所述的锌源或镉源、表面修饰剂、硒粉和硼氢化钠的摩尔质量比为1:0.3:0.5:2；所述的表面修饰剂为巯基丙酸或巯基乙酸。

7.权利要求1所述的光致发光-多声子共振拉曼散射双模纳米探针在生物分子检测方面的应用。

8.一种生物分子检测体系，它包括：

1）将权利要求1所述的光致发光-多声子共振拉曼散射双模纳米探针分散在Tris缓冲溶液中，加入待测物溶液，室温避光孵育1.5~2.5 h，得到纳米探针/待测物复合物；

2）清洗单晶硅片，涂覆或喷射金膜，将金膜涂覆的硅片浸泡在含有巯基的分子的溶液中，室温过夜孵育；用乙醇或Tris缓冲溶液冲洗，并用氮气流吹干，浸泡在待测物相对应的蛋白质分子、适配体分子、核酸分子或肽分子溶液中，最后浸泡在1 mmol/L的胎牛血清蛋白溶液中，封闭残余活性位点，得到捕获基底；

3）将步骤2）所述的捕获基底浸泡在步骤1）所述的纳米探针/待测物复合物溶液中，室温避光孵育1.5~2.5 h，形成生物分子检测体系；

4）检测光致发光、多声子共振拉曼散射光谱，对生物分子定性或定量。