[发明专利]一种链霉菌复合菌剂的制备和应用

说明书

本发明属于农业微生物领域，本发明公开了一种链霉菌复合菌剂的制备和应用。本发明提供的微白黄链霉菌W68采用液固两相法制备种子，其中的固体种子培养物可以连续传代三次。将制备的微白黄链霉菌菌剂与芽孢杆菌复配制备复合微生物菌剂，不仅具有防治植物病害的效果，还可以提高产量，具有较好的经济效益。

技术领域

本发明属于农业微生物领域，主要涉及一种链霉菌复合菌剂的制备和应用。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

链霉菌因可以产生种类丰富、结构多样的次级代谢产物而闻名，目前许多链霉菌物种的活菌制剂或者次级代谢产物已经广泛应用于医学、工业和农业中。

在我国农业生产中，作为微生物菌剂或微生物肥料登记的链霉菌物种，数量最多的分别是细黄链霉菌、弗氏链霉菌、娄彻氏链霉菌和密旋链霉菌，但链霉菌生防产品的数量比例却占生防产品总数量的不到2％。究其原因链霉菌的发酵工艺是制约链霉菌大规模产业化的关键因素。与芽孢类产品不同，链霉菌在液体中很难形成孢子，因此，无法利用目前市场上很成熟的液体发酵体系进行大规模生产，只能采用固体发酵工艺生产链霉菌的孢子制剂。目前我国各公司采用的固体发酵工艺存在占用空间大、操作批量小的特点，导致链霉菌产品无法大批量产出。因此，优化链霉菌的工厂化固体发酵工艺参数具有重要意义。

微白黄链霉菌W68是一株对多种植物病害具有显著防治效果的新型链霉菌，可以作为微生物肥料或微生物农药进行使用(ZL20610207349.1、ZL201610206913.8)。本发明开展了该菌株的发酵工艺和扩大化生产步骤的相关工作。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种适合工厂化生产微白黄链霉菌W68菌剂的固体发酵工艺。

为实现上述技术目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一个方面，提供了一种链霉菌复合菌剂的制备方法，包括：

将链霉菌活化，形成单菌落；

将单菌落接种至2×YT培养基或NM培养基中，进行培养，形成液体种子培养物；

将液体种子培养物接种于固体种子培养基中，静置培养后，摇晃发酵物使其充分混匀，继续培养3-4天，获得新鲜的一代固体种子培养物；

将获得的固体种子培养物进行连续三代培养；

将每批新鲜的固体种子培养物接种于固体发酵培养基中，静置培养2-3天后，翻动发酵物使其充分混匀，继续培养3-4天，自然风干后，获得的固体发酵培养物，即得微白黄链霉菌W68菌剂。与其他芽孢杆菌按照不同比例复配，即得微白黄链霉菌复合菌剂。

本发明的第二个方面，提供了上述的方法制备的链霉菌复合菌剂。

本发明的第三个方面，提供了上述的链霉菌复合菌剂在防治植物病害和/或促进植物生长中的应用。

本发明的有益效果在于：

(1)本发明的固体发酵工艺，固体种子可传代三次，满足工业化生产中大规模发酵的需求，既缩短时间，又不产生废弃污染物，具有环保的优点。

(2)本发明的复合微生物菌剂，不仅具有防治植物病害的功能，同时还具有促进植物生长的功能，达到有病治病，无病促生的功效。

(3)本发明提供的微白黄链霉菌W68菌剂和微白黄链霉菌W68与芽孢杆菌复合菌剂，既可以应用于普通蔬菜作物，还可以应用于棉花等经济作物上。