[发明专利]一种尿液中有机磷酸酯检测方法

权利要求书

1.一种尿液中有机磷酸酯检测方法，其特征在于，

包括以下步骤：

将尿液进行预处理，处理后尿液经稀释加入醋酸-醋酸铵缓冲溶液，将尿液pH值调节至4.5至7；

进行固相萃取，净化萃取尿液样本中的目标物质，以甲酸甲醇溶液和甲酸水溶液对萃取柱进行活化后添加尿液进行吸附，萃取后经淋洗，采用氨甲醇溶液进行洗脱，将获得的洗脱液在氮气下吹干，用甲醇水溶液进行复溶；

对处理后的尿液样品进行液相色谱串联质谱分析，以内标法建立标准曲线，计算样本平均回收率和相对标准偏差，并与标准参考物质比较；

其中，目标物质包括DMP（O,O-dimethyl phosphate，磷酸二甲酯，CAS 37919-86-1）、DMTP（O,O-dimethyl thiophosphate，二甲基硫代磷酸酯，CAS 28523-79-7）、DMDTP（O,O-dimethyl dithiophosphate，二甲基二硫代磷酸酯，CAS 16001-68-6）、DEP（O,O-diethylphosphate，磷酸二乙酯，CAS 53971-30-5）、DETP（O,O-diethyl thiophosphate，二乙基硫代磷酸酯，CAS 5871-17-0）、DEDTP（O,O-diethyl dithiophosphate，二乙基二硫代磷酸酯，CAS 3454-66-8）、BCEP（Bis(2-chloroethyl) phosphate，磷酸双（2-氯乙基）酯，CAS 3040-56-0）、BCIPP（Bis(1-chloro-2-propyl) phosphate，磷酸双（2-氯丙基）酯，CAS 789440-10-4）、BDCIPP（Bis(1,3-dichloro-2-propyl) phosphate，磷酸双(1,3-二氯-2-丙基)酯，CAS 72236-72-7）、DPHP（Di-phenyl phosphate，磷酸二苯酯，CAS 838-85-7）、DiBP（Di-iso-butyl phosphate，磷酸二异丁酯，CAS 6303-30-6）、DnBP（Di-n-butyl phosphate，磷酸二正丁酯，CAS 107-66-4）、DoCP（Di-o-tolyl-phosphate，磷酸二邻甲苯酯，CAS 35787-74-7）、DmCP（Di-m-tolyl-phosphate，磷酸二间甲苯酯，CAS 36400-46-1）、DpCP（Di-p-tolyl-phosphate，磷酸二对甲苯酯，CAS 843-24-3）和BBOEP（Bis(2-butoxyethyl)phosphate，磷酸双（2-丁氧基乙基）酯，CAS 14260-97-0）；

所述液相色谱串联质谱分析的条件为：

流动相由A相0.1％甲酸水溶液和B相0.1％甲酸乙腈溶液；

色谱柱为Waters Acquity UPLC HSS T3 column (超高效液相高强度硅胶色谱柱，1.8μm × 2.1 mm × 100 mm)；

洗脱方式：梯度洗脱；

所述梯度洗脱为：

流动相B以0％初始浓度保持1分钟、流动相A为100%，流动相B在5分钟内增加到50％、流动相A为50%，流动相B在9.5分钟内上升到100％并保持1.5分钟、流动相A为0%，流动相B在0.1分钟内返回到0％并保持1.9 分钟直至平衡下一个样品、对应的流动相A在此期间为100%，所有分析物在13分钟内完成分析；

质谱条件为：

离子源：ESI；

源温度：150℃；

去溶温度：500℃；

去溶气体流速：1000L/h；

检测模式：MRM。

2.根据权利要求1所述的尿液中有机磷酸酯检测方法，其特征在于，所述尿液体积为200μL，所述尿液稀释采用去离子水800μL。

3.根据权利要求2所述的尿液中有机磷酸酯检测方法，其特征在于，所述活化液采用2%甲酸甲醇溶液添加量为2mL及2%甲酸水溶液添加量为2mL。

4.根据权利要求3所述的尿液中有机磷酸酯检测方法，其特征在于，所述采用氨甲醇溶液进行洗脱，采用5%氨甲醇溶液添加量为2mL。