[发明专利]一种产顺-11-十六碳烯醛破囊壶菌菌株的培育方法

权利要求书

1.一种产顺-11-十六碳烯醛破囊壶菌菌株的培育方法，其具体步骤如下：

(1)取破囊壶菌于活化培养基中得活化菌液，将活化后的菌液离心，去除上清液，用无菌生理盐水将菌体悬浮，获得细胞浓度在10⁷～10⁹CFU/mL的菌悬液；

(2)在无菌条件下，取步骤(1)获得的菌悬液均匀平铺在固体培养皿中，平铺量为1.5～2mL/cm²，进行氮离子注入诱变，注入能量为20～40keV，氮离子注入量为5～50×10¹⁴ions/cm²；

(3)将步骤(2)中经过氮离子注入诱变的菌液用无菌生理盐水稀释体积50～150倍，取稀释后的菌液均匀涂布在M4培养基上，涂布的量为50～100μL/cm²，放入培养箱中培养；

(4)于M4平板上挑选出单菌落作为初筛菌；

(5)将步骤(4)中获得的初筛菌进行发酵培养，得到能稳定产顺-11-十六碳烯醛的破囊壶菌菌株。

2.如权利要求1所述的培育方法，其特征在于步骤(1)中所述的活化培养基的成分为：葡萄糖50～55g/L、无水乙醇5～8g/L，酵母提取物2～3g/L、K₂HPO₄0.2～0.3g/L，人工海盐13～14g/L、蛋白胨0.1～0.2g/L。

3.如权利要求1所述的培育方法，其特征在于步骤(1)中活化培养条件为：在温度28～30℃，转速160～180rpm，pH为6.5～7.5条件下培养3～6天。

4.如权利要求1所述的培育方法，其特征在于步骤(3)中放入培养箱中培养条件为15～30℃中恒温培养24～48h。

5.如权利要求1所述的培育方法，其特征在于步骤(3)中M4培养基成分为：葡萄糖20～22g/L，蛋白胨1.5～2g/L，酵母提取物1.0～2.0g/L，人工海盐33～36g/L，琼脂粉20～25g/L。

6.如权利要求1所述的培育方法，其特征在于步骤(5)中发酵培养条件为：温度为15～30℃、转速为200～250r/min，培养时间为4～6天。