[发明专利]一种生姜姜半夏渗漉液中成分的定量指纹图谱分析方法

说明书

本发明公开了一种生姜姜半夏渗漉液中成分的定量指纹图谱分析方法。所述方法为：(1)制备供试品溶液和对照品混合溶液；(2)将对照品混合溶液和供试品溶液采用高效液相色谱仪进行分析，得到生姜姜半夏渗漉液中成分的定量指纹图谱。其中色谱条件为：仪器选用高效液相色谱系统，色谱柱选用Waters Atlantis T3色谱柱(100mm×2.1mm，3.0μm)；采用DAD检测器；流量为0.30mL/min，柱温为25℃，进样体积为3μL～5μL；以纯水和乙腈作为流动相；(3)选择不同批次的生姜姜半夏渗漉液的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰，计算不同批次渗漉液的成分含量并计算相似度，为生姜姜半夏渗漉液的质量控制提供科学依据和技术支持。本发明方法弥补小柴胡胶囊生产中间体化学成分检测方法的缺失。

技术领域

本发明涉及一种中药的检测方法，具体涉及一种生姜姜半夏渗漉液中成分的定量指纹图谱分析方法。

背景技术

小柴胡胶囊是由柴胡、黄芩、甘草、党参、大枣、生姜、姜半夏七味药材通过煎煮、渗漉、浓缩等工艺制成的复方制剂，可用于外感病，邪犯少阳证，症见寒热往来、胸胁苦满、食欲不振、心烦喜呕、口苦咽干等。小柴胡胶囊的中间体包括生姜和姜半夏等两味药材的渗漉液，柴胡、黄芩、甘草、党参、大枣等五味药材混煎液，以及多种浓缩液。

国际公认的药品“质量源于设计”理念，认为药品质量控制重心应该从成品前移至原料、中间体和制药过程。所以对小柴胡胶囊生产中间体的质量控制应该受到重视。但是目前对于小柴胡胶囊质控的研究仅限于制剂成品和药材，对中间体的质控方法研究未见报道。

近年来，从药材到饮片到中间体再到制剂的量值传递研究广泛用于中药经典名方和配方颗粒的开发。通过观察指标成分从药材到饮片到中间体再到制剂的数量变化，就可以确定中间体的质量标准，也可以从监管的角度防止非法添加。为了测定指标成分的量值传递规律，就有必要建立中间体中指标成分的分析方法。该分析方法同样也可以用于制药过程控制等。相比制剂，中间体的化学成分有时会简单一些，此时可以考虑采用相对较容易实现的分析条件。

生姜和姜半夏的渗漉液是小柴胡胶囊的重要中间体。根据2020版《中国药典》(一部)，该中间体由生姜和姜半夏混合投料，再用70％乙醇浸渍24小时后，缓慢渗漉制得。目前也未见有文献报道该中间体的质量分析方法。

本发明拟开发体现生姜姜半夏渗漉液中成分的定量指纹图谱检测方法，通过增强生姜和姜半夏渗漉液中间体品质控制，为进一步提高小柴胡胶囊产品质量一致性打好基础。

发明内容

本发明的主要目的是提供一种生姜姜半夏渗漉液中成分的定量指纹图谱分析方法，该方法可以本发明方法能弥补小柴胡胶囊生产中间体化学成分检测方法的缺失，从而更加全面地检测并评价生姜姜半夏渗漉液的质量，有利于提高小柴胡胶囊生产中间体的质量控制水平。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明的目的之一：提供一种生姜姜半夏渗漉液成分的定量指纹图谱分析方法，所述的生姜姜半夏渗漉液是生姜和姜半夏用70％乙醇作溶剂，浸渍24小时后，缓缓渗漉，收集得到的渗漉液。所述的指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：

(1)对照品混合溶液以及供试品溶液的制备：

对照品混合溶液的制备：精密称定尿苷、腺嘌呤、5-羟甲基糠醛、鸟苷对照品，置于容量瓶中，用纯水定容至刻度，摇匀，制成含12.5μg/mL尿苷、23.9μg/mL腺嘌呤、51.5μg/mL5-羟甲基糠醛、21.5μg/mL鸟苷组成的混合对照品溶液。

供试品溶液的制备：量取生姜姜半夏渗漉液1.5mL，35℃下离心浓缩至干，加入1.0mL纯水复溶后，12000rpm离心10min，取上清液，即得。

(2)高效液相色谱测定