[发明专利]一种基于酰胺键的吩噁嗪衍生物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于酰胺键的吩噁嗪衍生物，其特征在于具有如下任一结构式的化合物：

2.如权利要求1所述的吩噁嗪衍生物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将碱性蓝3、碳酸钠和二氯甲烷混合物在氮气保护下搅拌并加热至45℃，并在此温度下缓慢加入用水溶解的连二亚硫酸钠，将混合物在45℃下反应至溶液由蓝色变为红色(约30min～1h)，反应完毕后停止加热并在保持搅拌10min，静置至体系分层；其中投料摩尔比为碱性蓝3染料:碳酸钠:连二亚硫酸钠＝1:4～5:4～5。

(2)在另一氮气保护体系中加入4-二甲氨基吡啶和碳酸钠，冰浴条件下边搅拌边加入步骤(1)中静置分层后的二氯甲烷相，之后缓慢滴入环丙基甲酰氯，反应2小时后停止反应，将反应体系过滤，得到深蓝色粗产物溶液；旋蒸除去溶剂并将粗产物进行硅胶柱色谱纯化，得到淡黄色固体目标产物，即为吩噁嗪衍生物；其中投料摩尔比为碳酸钠:4-二甲氨基吡啶:环丙基甲酰氯＝12.5～14:5:6；所述的环丙基甲酰氯可用环丁基甲酰氯、环戊基甲酰氯或环己基甲酰氯替代。

3.如权利要求2所述的吩噁嗪衍生物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述投料摩尔比为碱性蓝3染料:碳酸钠:连二亚硫酸钠＝1:4:4。

4.如权利要求2所述的吩噁嗪衍生物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述投料摩尔比为碳酸钠:4-二甲氨基吡啶:环丙基甲酰氯＝12.5:5:6。

5.如权利要求1所述的吩噁嗪衍生物在制备检测羧酸酯酶探针中的应用，所述的吩噁嗪衍生物为CEs-1、CEs-2或CEs-3。

6.一种检测羧酸酯酶的方法，其特征在于，步骤为：

(1)配制pH 7.4的10mM的磷酸缓冲盐溶液；将权利要求1所述吩噁嗪衍生物溶于N,N-二甲基甲酰胺配制成2mM的储备液；将羧酸酯酶冻干粉溶于水配制60U/mL的羧酸酯酶储备液；

(2)荧光光谱：取830μL的磷酸缓冲盐溶液、2.5μL吩噁嗪衍生物储备液、167μL的羧酸酯酶储备液加入到比色皿中，立即以630nm激发光进行荧光光谱扫描，时间间隔为10min；

(3)动力学曲线：取830μL的磷酸缓冲盐溶液、2.5μL吩噁嗪衍生物储备液、167μL的羧酸酯酶储备液加入到比色皿中，立即以630nm激发波长进行动力学扫描，时长为4800s；

所述的吩噁嗪衍生物为CEs-1、CEs-2或CEs-3。

7.如权利要求1所述的吩噁嗪衍生物在制备细胞成像试剂中的应用，所述的吩噁嗪衍生物为CEs-1、CEs-2或CEs-3。