[发明专利]一种自体血制备固态或液态自然浓缩生长因子CGF的方法

说明书

本发明属于自然浓缩生长因子CGF制备技术领域，涉及一种自体血制备固态或液态自然浓缩生长因子CGF的方法。血液采集后，分别注入紫色无菌防凝试管和无菌真空红色采血管，紫色无菌防凝试管中加入混合防凝剂，摇匀后离心，然后取取中间CGF层，得到液态CGF；无菌真空红色采血管离心后取中间层及中间层、下层交界处凝胶，压膜器压制定型，得到固态CGF。CGF制取量大，操作方便，实用性强，具有较高的市场应用前景。

技术领域

本发明属于自然浓缩生长因子CGF制备技术领域，涉及一种自体血制备固态或液态自然浓缩生长因子CGF的方法。

背景技术

血浆提取物的研究大致经历了富血小板血浆（Platelet-rich plasma，PRP），富血小板纤维蛋白（Platelet-rich fibrin，PRF），浓缩生长因子（Concentrate GrowthFactors，CGF）三个阶段。PRP由于含凝血酶及动物血清，并采用一次离心法，容易被污染及致敏，面临淘汰。PRF与CGF相比，扫描电镜结果显示富血小板纤维蛋白和浓缩生长因子的上部分可见不同直径的胶原纤维排列成三维网状结构，胶原纤维上可见大量颗粒状血小板附着，无细胞结构；富血小板纤维蛋白中的胶原纤维排列成条索状，而浓缩生长因子中的胶原纤维排列成栅栏状；ELISA实验结果表明浓缩生长因子中转化生长因子、血小板衍生生长因子、胰岛素样生长因子和血管内皮生长因子的含量均高于PRP及PRF。

自体血的CGF是由Sacco首次开发出来的，但是制备过程并不完善，产品的生产过程也得不到很好的保障，影响了其疗效。

自体血CGF比自体血PRP含有更高浓度、更多数量的生长因子、纤维蛋白和大量的CD34+细胞，CGF凝胶质地柔软，富有弹性便于塑形并缓慢释放，由大量纤维蛋白交织成的三维立体网状结构组成，且纤维蛋白网的结构较疏松，具有改善并增强组织再生的功能。因此，保证生长因子的浓度及活性至关重要。自体血取出后需要立即加入一次性真空采血管立即变速连续离心，以制备固态的CGF。但若制备液态的CGF, 由于机器没有配套的防凝剂及试管、试剂和耗材，须另外采购有资质的上述试剂耗材，手续十分繁琐。

国外的Medifuge离心机（Silfradent，意大利塞法登特公司生产）造价为十几万，并需用专用试管配套离心，而国产的变速离心机仅一万左右，但只能制备固态的CGF。制备液态的CGF没有国产配套的试剂耗材，限制了CGF应用于骨性关节炎、整形美容、糖尿病足等疾病。

发明内容

本发明针对传统国产离心机无法同时制备固体和液体CGF的问题中存在的问题提出一种新型的自体血制备固态或液态自然浓缩生长因子CGF的方法。

为了达到上述目的，本发明是采用下述的技术方案实现的：

一种自体血来源的浓缩生长因子套装制备方法，能同时制备固体和液体两种CGF。

固态CGF制备：采集血10毫升，加入无菌真空红色采血管离心，按离心机S1键，自动连续变速四次离心，取得固态CGf，若需要不同形状的固态CGf，在无菌纱布上挤压塑形即可。

液态CGF制作：用采血针抽血10ml，注入紫色无菌防凝试管，摇匀，放入CGF口腔离心机，配平，按键S1，连续变速离心四次，制备成液态CGf。

离心程序如下：加速30s，2700r/min离心2min后，2400r/min离心4min；2 700r/min离心4min；3 000r/min离心3min,最后减速36s停止。离心13min后，血液分为3层，上层为贫血小板血浆（Platelet-poorplasma，PPP），中层为CGF，下层为红细胞（Red bloodcell，RBC）；；离心13min后，血液分为3层，上层为贫血小板血浆（Platelet-poorplasma，PPP），中层为CGF，下层为红细胞（Red bloodcell，RBC）。