[发明专利]一种控制癌性疼痛的医院制剂中二氢黄酮类成分的提取方法

权利要求书

1.一种外用控制癌性疼痛的二氢黄酮提取物的提取方法，其特征在于：所述提取方法是将制剂与川芎蛋白溶液进行包合，40kHz超声30分钟，于30KDa超滤管离心，滤液冷冻干燥，即得外用控制癌性疼痛的二氢黄酮提取物；

所述制剂中药原料按照重量组分计算：由草乌10-60份、透骨香20-100份、黑骨藤10-60份、八角枫5-50份、大血藤20-100份、海芋10-60份、雪上一支蒿5-40份、川乌10-60份、天南星10-60份、飞龙掌血10-60份、白屈菜10-60份组成；

所述制剂的制备方法为：按照比例称取方中所有药材，将其湿热灭菌，粉碎成细粉，装入布袋中，按1g对1ml计，加入3倍量乙醇，置密闭容器中，密闭浸渍，过滤后得药液a，剩余药渣再加入乙醇，浸渍，过滤后得药液b；合并药液a和药液b，静置24~48小时，取上清液加乙醇定容，制成1000ml溶液，灌装，即得；

所述川芎蛋白的制备方法为：精密称取川芎药材粉末3 g，加入Tris-HCl（ 68 mmol/L，0.5% SDS，5%甘油，10%β-巯基乙醇）溶液，置于4 ℃ 冰箱浸提1.5 h。5000 r/min 离心10min，收集上清，加入3 倍量10%TCA-丙酮，置−20℃冰箱沉淀1.5 h，5000 r/min 离心10min，收集沉淀，分别用丙酮及80%丙酮洗涤3次，5000r/min 离心10 min，收集沉淀，冷冻干燥即得川芎蛋白;

所述二氢黄酮提取物的提取方法是按照以下步骤进行：

a、 取川芎蛋白，溶解于水中，即得川芎蛋白溶液，备用，即A品；

b、取制剂浓缩至干，用少量水溶解分散，上聚酰胺柱，聚酰胺柱水洗至无色后，加入30%乙醇冲洗，收集30%乙醇冲洗液得到总黄酮，即得B品；

c、将上述B品在20~30℃、300~500rpm持续搅拌下，逐滴加入A品中，B品与A品体积比为1:3~1:5，滴加完毕后，持续搅拌0.5-3小时，所得溶液在10000 rpm条件下低温高速离心30分钟，得到包合沉淀物，即得C品；

d、取上述C品加入少量水分散，超声，破碎后的溶液装入30KDa超滤管，于低温高速离心，所得滤液冷冻干燥，即得外用控制癌性疼痛的二氢黄酮提取物。

2.如权利要求1所述一种外用控制癌性疼痛的二氢黄酮提取物的提取方法，其特征在于：所述制剂中药原料按照重量组分计算：由草乌20-40份、透骨香50-70份、黑骨藤20-40份、八角枫10-30份、大血藤50-70份、海芋20-40份、雪上一支蒿5-15份、川乌20-40份、天南星10份、飞龙掌血20-40份、白屈菜20-40份组成。

3.如权利要求1或2所述一种外用控制癌性疼痛的二氢黄酮提取物的提取方法，其特征在于：所述制剂中药原料按照重量组分计算：由草乌30份、透骨香60份、黑骨藤30份、八角枫20份、大血藤60份、海芋30份、雪上一支蒿10份、川乌30份、天南星10份、飞龙掌血30份、白屈菜30份组成。

4.如权利要求1所述一种外用控制癌性疼痛的二氢黄酮提取物的提取方法，其特征在于：所述制剂的制备方法为：按照比例称取方中所有药材，将其湿热灭菌，粉碎成细粉，装入布袋中，按1g对1ml计，加入3倍量55%酒精，置密闭容器中，密闭浸渍4天，过滤后得药液a，剩余药渣再加入3倍量55%酒精，浸渍3天，过滤后得药液b；合并药液a和药液b，静置24~48小时，取上清液加55%酒精定容，制成1000ml溶液，灌装，即得控制癌性疼痛的医院制剂。

5.如权利要求1所述一种外用控制癌性疼痛的二氢黄酮提取物的提取方法，其特征在于：所述二氢黄酮提取物是按照以下步骤进行：

a、取川芎蛋白，按质量体积比3:1溶解于水中，即得川芎蛋白溶液，备用，即A品；

b、取制剂浓缩至干，用少量水溶解分散，按控制癌性疼痛的医院制剂：聚酰胺=1：20的比列上聚酰胺柱，聚酰胺柱水洗至无色后，加入5-8倍柱体积30%乙醇冲洗，收集30%乙醇冲洗液得到总黄酮，即得B品；

c、将上述B品在20~30℃、300~500rpm持续搅拌下，逐滴加入A品中，B品与A品体积比为1:3~1:5，滴加完毕后，持续搅拌0.5-3小时，所得溶液在10000 rpm条件下低温高速离心30分钟，得到包合沉淀物，即得C品；

d、取上述C品加入少量水分散，40kHz超声30分钟，破碎后的溶液装入30KDa超滤管，于10000 rpm条件下低温高速离心10分钟，所得滤液冷冻干燥，即得外用控制癌性疼痛的二氢黄酮提取物。