[发明专利]一种多合一农药残留定量检测试纸和检测方法

说明书

本发明属于农药检测技术领域，具体涉及一种多合一农药残留定量检测试纸和检测方法。该检测试纸的胶体金结合垫上附着有至少两种农药的金纳米颗粒标记抗体；层析膜上设置有质控线和至少两条检测线，每条检测线采用一种农药的抗原包被而成；所述农药选自毒死蜱、甲拌磷、乐果、啶虫脒、多菌灵、腐霉利、甲氰菊酯、克百威、异丙威、百菌清、氟虫氰、对硫磷、涕灭威、三唑酮、水胺硫磷或对硫磷。通过优选农药种类及其抗原和抗体的制备方法，本发明克服了对多种农药进行同时检测时检测目标相互干扰的问题，具有特异性好、灵敏度高、能够准确定量、能够同时检测多种组分和前处理简单等优点，因而具有很好的应用前景。

技术领域

本发明属于农药检测技术领域，具体涉及一种多合一农药残留定量检测试纸和检测方法。

背景技术

农药残留(Pesticide residues)是农药使用后一个时期内没有被分解而残留于生物体、收获物、土壤、水体、大气中的微量农药原体、有毒代谢物、降解物和杂质的总称。

施用于作物上的农药，其中一部分附着于作物上，一部分散落在土壤、大气和水等环境中，环境残存的农药中的一部分又会被植物吸收。残留农药直接通过植物果实或水、大气到达人、畜体内，或通过环境、食物链最终传递给人、畜。农残剥离器可以降解水果蔬菜表面的农药残留。

越来越严峻的贸易技术壁垒和食品安全问题，要求不断提高我国的检验检疫水平，以突破技术壁垒。面对目前食品安全中日益增多的检测项目和日渐严格的残留限量标准，开发高通量、快速、准确、灵敏的农药多残留分析技术，同时对多种类不同极性残留物质进行分析，监督控制食品污染和保证食品质量，已成为刻不容缓的任务。

胶体金免疫层析法是一种常用的检测方法，其原理是基于抗原和抗体的特异性识别和结合反应。将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，胶体金标记试剂(抗体或单克隆抗体)吸附在结合垫上，当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后，通过毛细作用向前移动，溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应，当移动至固定的抗原或抗体的区域时，待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，可通过肉眼观察到显色结果。该法现已发展成为诊断试纸条，使用十分方便。

针对农药残留的检测，也可使用胶体金免疫层析法，例如，中国发明专利“CN1203317C克百威农药的纳米胶体金标记免疫测定方法”提供了一种利用胶体金免疫层析法检测克百威农药的方法。其以改良活性酯法将克百威免疫半抗原BFNH与BSA偶联，合成人工免疫抗原复合物，免疫动物，制备特异性高效价抗BFNH抗体，抗体经分离纯化后，将纳米级的胶体金标记于抗克百威的特异性抗体，然后将此标记结合物、偶联卵清蛋白的克百威以及羊抗鼠IgG分别固化在一载体上，根据竞争抑制免疫层析原理，进行克百威农药的半定量分析测定，所建立的检测体系对克百威农药的最小检测量为0.25mg/kg，且在10分钟内完成快速检测。

然而，现有的胶体金免疫层析法用于农药检测时，只实现对单一一种农药的检测。而如果希望在同一试纸上进行多种农药的同时检测，则对检测的特异性存在着极高的要求，否则易出现各检测农药分子间的相互干扰，这导致了基于胶体金免疫层析法的多合一农药检测试纸和检测方法的开发存在着较大的困难。因而，目前还未实现基于胶体金免疫层析法的多合一农药检测。

发明内容

针对现有技术的缺陷，本发明提供一种多合一农药残留定量检测试纸和检测方法，目的在于通过克服农药多合一检测中对特异性高要求的障碍，实现对多种农药的同时检测。

一种多合一农药残留定量检测试纸，包括依次连接的样品垫、胶体金结合垫和层析膜；

所述胶体金结合垫上附着有至少两种农药的金纳米颗粒标记抗体；

所述层析膜上设置有质控线和至少两条检测线，每条检测线采用一种农药的抗原包被而成；

所述农药选自毒死蜱、甲拌磷、乐果、啶虫脒、多菌灵、腐霉利、甲氰菊酯、克百威、异丙威、百菌清、氟虫氰、对硫磷、涕灭威、三唑酮、水胺硫磷或对硫磷；