[发明专利]一种脂肪间充质干细胞冻存保护液及冻存方法在审
申请号: | 202210163439.0 | 申请日: | 2022-02-22 |
公开(公告)号: | CN114651812A | 公开(公告)日: | 2022-06-24 |
发明(设计)人: | 杨明;顾海红 | 申请(专利权)人: | 杨明 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266000 山东省青岛市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 脂肪 间充质 干细胞 保护 方法 | ||
1.一种脂肪间充质干细胞冻存保护液,其特征在于,包括基础培养基和添加在培养基中的以下成分:甘油、普鲁卡因微囊、香柑内酯、白藜芦醇、维生素C、胰岛素;各成分在培养基中的终浓度为:甘油20-30μg/mL、普鲁卡因微囊1-5ng/mL、香柑内酯3-8ng/mL、白藜芦醇5-10μg/mL、维生素C1-2mg/mL、胰岛素0.5-1mg/mL。
2.根据权利要求1所述脂肪间充质干细胞冻存保护液,其特征在于,各成分在培养基中的终浓度为:甘油25μg/mL、普鲁卡因微囊3ng/mL、香柑内酯5ng/mL、白藜芦醇8μg/mL、维生素C1.5mg/mL、胰岛素0.7mg/mL。
3.根据权利要求1所述脂肪间充质干细胞冻存保护液,其特征在于,所述基础培养基为DMEM/F12。
4.根据权利要求1或2所述脂肪间充质干细胞冻存保护液,其特征在于,所述普鲁卡因微囊的制备方法如下:取壁材溶解于无水乙醇中,壁材的质量浓度为1-2%,加入芯材普鲁卡因粉末,混合均匀后经喷雾干燥得到普鲁卡因微囊。
5.根据权利要求4所述脂肪间充质干细胞冻存保护液,其特征在于,所述壁材为羧甲基纤维素钠,所述羧甲基纤维素钠和普鲁卡因粉末的质量比为1:0.2-0.3。
6.一种脂肪间充质干细胞的冻存方法,其特征在于,采用权利要求1至5任一项所述保护液冻存。
7.根据权利要求6所述脂肪间充质干细胞的冻存方法,其特征在于,包括以下过程:将待保存的脂肪间充质干细胞采用保护液重悬,程序降温至-80℃,在-80℃保存4-6h,然后转移至液氮中冻存。
8.根据权利要求7所述脂肪间充质干细胞的冻存方法,其特征在于,所述保护液中脂肪间充质干细胞的密度为106-107个/mL。
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