[发明专利]一种脂肪间充质干细胞复苏培养液及复苏方法

权利要求书

1.一种脂肪间充质干细胞复苏培养液，其特征在于，包括基础培养基，与添加在基础培养基中的各组分：胰岛素、黄芪多糖、乙内酰脲、普利醇、荆芥内酯、L-谷氨酰胺、维生素C。

2.根据权利要求1所述脂肪间充质干细胞复苏培养液，其特征在于，所述基础培养基为DMEM/F12培养基。

3.根据权利要求1所述脂肪间充质干细胞复苏培养液，其特征在于，各组分在基础培养基中的终浓度为：胰岛素20-30μg/mL、黄芪多糖25-35μg/mL、乙内酰脲6.5-9.5ng/mL、普利醇10-15ng/mL、荆芥内酯3.5-5.5ng/mL、L-谷氨酰胺15-20ug/mL、维生素C10-20 ng/mL。

4.根据权利要求1所述脂肪间充质干细胞复苏培养液，其特征在于，各组分在基础培养基中的终浓度为：胰岛素25μg/mL、黄芪多糖30μg/mL、乙内酰脲8.5ng/mL、普利醇12ng/mL、荆芥内酯4.5ng/mL、L-谷氨酰胺18ug/mL、维生素C15 ng/mL。

5.一种脂肪间充质干细胞的复苏方法，其特征在于，采用权利要求1至4任一项所述复苏培养液进行复苏。

6.根据权利要求5所述脂肪间充质干细胞的复苏方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)向基础培养基中加入胰岛素、黄芪多糖、乙内酰脲、普利醇、荆芥内酯、L-谷氨酰胺、维生素C，混合均匀后过滤除菌得到复苏液，备用；

(2)取冻存的脂肪间充质干细胞在37-40℃条件下快速复苏，加入复苏液稀释后离心收集脂肪间充质干细胞；

(3)向步骤(2)的细胞中加入复苏液重悬，在37℃，5％CO₂条件下复苏培养10-12h，即完成。

7.根据权利要求6所述脂肪间充质干细胞的复苏方法，其特征在于，步骤(3)复苏液中脂肪间充质干细胞的浓度为5-8×10⁴个/mL。

8.根据权利要求6所述脂肪间充质干细胞的复苏方法，其特征在于，采用0.22μm的滤菌膜过滤除菌。