[发明专利]一种毛囊外根鞘细胞培养基

说明书

本发明提供了一种毛囊外根鞘细胞培养基，以DMEM/F‑12为基础培养基，包含以下含量的组分：人参皂苷40‑60μg/mL、黄芪多糖20‑90μg/mL、表皮生长因子0.1‑6ng/mL、纤维生长因子16‑20ng/mL、氢化可的松0.1‑10μg/mL、转铁蛋白9‑15μg/mL、壳聚糖4‑9μg/mL、烟酰胺1‑7μg/mL。本发明提供的一种毛囊外根鞘细胞培养基，添加的人参皂苷和黄芪多糖具有协同作用，能够显著提高毛囊外根鞘细胞的再生和分化能力，表皮生长因子和纤维生长因子的加入可以进一步促进毛囊外根鞘细胞的分裂、繁殖和生长分化。

技术领域

本发明是一种毛囊外根鞘细胞培养基，属于细胞工程技术领域。

背景技术

毛囊是表皮向真皮凹陷后形成的能控制毛发生长的皮肤附属器官，是由胚胎期神经外胚层与间充质相互作用，最终发育形成的由多层细胞组成的、具有合成多种特异角质蛋白功能的复杂的动态器官。

外根鞘是毛囊结构的重要组成部分，具有高度增生的潜能，因此外根鞘细胞(ORSC)在创面愈合领域具有较高的研究价值。目前毛囊外根鞘细胞的培养较为复杂，再生和分化效率比较低，因此，开发新的技术和方法来提高细胞的再生和分化能力是非常重要的。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的是提供一种毛囊外根鞘细胞培养基，使毛囊外根鞘细胞具有较高的再生和分化能力。

为了实现上述目的，本发明提供了一种毛囊外根鞘细胞培养基的制备方法，包括如下步骤：以DMEM/F-12为基础培养基，包含以下含量的组分：

采用上述方案，人参皂苷和黄芪多糖具有协同作用，能够提高毛囊外根鞘细胞的再生和分化能力，表皮生长因子和纤维生长因子的加入可以进一步促进毛囊外根鞘细胞的分裂、繁殖和生长分化，氢化可的松能够抗病毒，防止细菌内毒素的损害作用，转铁蛋白、壳聚糖和烟酰胺为毛囊外根鞘细胞提供了营养物质，促使毛囊外根鞘细胞生长。

优选的，以DMEM/F-12为基础培养基，包含以下含量的组分：

优选的，还包括自体血清，所述自体血清的体积百分含量为4-6％。

采用上述方案，加入的自体血清不会引入外源蛋白，避免了外源血清存在的安全隐患。

优选的，还包括无机盐，所述无机盐的含量为1-4mg/mL。

优选的，还包括维生素C，所述维生素C的含量为50-56μg/mL。

优选的，还包括氨基酸，所述氨基酸的含量为40-60ng/mL。

优选的，所述氨基酸为非必需氨基酸。

采用上述方案，加入的无机盐、维生素C和氨基酸为细胞再生提供了营养物质。

优选的，还包括羟基乙醇，所述羟基乙醇的含量为15-18mg/mL。

优选的，还包括海藻糖，所述海藻糖的含量为50-200μg/mL。

采用上述方案，加入的海藻多糖能够有效的保持毛囊外根鞘细胞的活性，并且对人体无任何伤害。

优选的，还包括牛垂体提取物、胰岛素、肾上腺素、氯化钙，所述牛垂体提取物的含量为10-50mg/mL、所述胰岛素的含量为2-10μg/mL，所述肾上腺素的含量为0.1-0.6μg/mL，所述氯化钙的含量为10-15μg/mL。