[发明专利]一种菲啶和苯并噻唑共轭链接的荧光染料合成和应用

说明书

本发明涉及荧光染料领域，提出了一种菲啶和苯并噻唑共轭链接的荧光染料，具有如下结构式：通过上述技术方案，解决了现有技术中的荧光染料检测DNA时易受到溶液中其他带电物质的干扰、不能同时应用于蓝光仪和紫外凝胶成像仪的问题。

技术领域

本发明属于荧光染料领域，涉及一种菲啶和苯并噻唑共轭链接的荧光染料合成和应用。

背景技术

荧光染料是指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光光波的物质，在吸收可见光和紫外光转变为波长较长的可见光波而反射出来，是一种广泛使用的荧光标示剂，又称为荧光探针，具有检测速度快、重复性好、用样量少、无辐射等优点，可用于检测DNA、蛋白质、酶、金属离子等等。

在荧光染料用于检测DNA时，主要是利用底物与荧光染料之间的静电相互作用力而与荧光染料之间形成复合物。但是，应用静电相互作用力检测DNA有一个缺点，就是容易受到溶液中其他带电物质的干扰，不能同时应用于蓝光仪和紫外凝胶成像仪。

发明内容

本发明提出一种菲啶和苯并噻唑共轭链接的荧光染料合成和应用，解决了现有技术中的荧光染料检测DNA时易受到溶液中其他带电物质的干扰、不能同时应用于蓝光仪和紫外凝胶成像仪的问题。

本发明的技术方案是这样实现的：

一种菲啶和苯并噻唑共轭链接的荧光染料，具有如下结构式：

上述荧光染料应用，所述荧光染料用于聚合酶链式反应、核酸凝胶电泳染料、织物印染、蛋白质以及生物大分子染色。

上述荧光染料的合成，包括以下步骤：

S1、在氮气保护下，式1的化合物与碘甲烷在210℃下反应4小时，制备式3的化合物；

S2、在氮气保护下，式4的化合物与6-溴-1-己酸溶于无水乙醇中，在氮气保护下加热至35℃反应4小时，制备式6的化合物；

S3、将式3的化合物和式6的化合物溶于乙醇中，在氮气保护下加入三乙胺，反应3小时，制备式7的化合物；

S4、将式7的化合物和2-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯溶于乙腈中，加入三乙胺，反应4小时，得到式8的化合物的乙腈溶液；

S5、将式9的化合物溶于DMF中，加入2-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯，搅拌30分钟后，加入三乙醇胺，在20-25℃下反应30min，加入乙二胺，反应12-16小时，制备式11的化合物；

S6、将式11的化合物溶于DMF中，加入式8的化合物的乙腈溶液，反应12-16小时，得到一种菲啶和苯并噻唑共轭链接的荧光染料。

本发明的工作原理及有益效果为：

1、本发明中，提出了一种菲啶和苯并噻唑共轭链接的荧光染料，该荧光染料在检测DNA时，不受溶液中其他带电物质的干扰，克服了现有技术中的荧光染料应用静电相互作用力检测时的缺点，显著提高了荧光染料辨别单双链DNA分子的能力以及检测DNA的灵敏度，并实现了同时应用于蓝光仪和紫外凝胶成像仪下核酸电泳染色。

2.本发明中，菲啶和苯并噻唑共轭链接的荧光染料性能稳定，适合定量PCR同时适合蓝光仪和紫外凝胶成像仪下核酸电泳染色，可用于聚合酶链式反应、核酸凝胶电泳染料、织物印染、蛋白质以及生物大分子染色。

3.本发明中，以菲啶类化合物和苯并噻唑类化合物为原料，经过一系列的反应，制得菲啶和苯并噻唑共轭链接的荧光染料，产物纯度高，性能稳定。